捕食者應(yīng)激模型的建立及其對小鼠卵母細(xì)胞發(fā)育能力影響的研究.pdf

1、眾所周知，生活中應(yīng)激無處不在，不可避免。近年來，隨著社會生活節(jié)奏的不斷加快以及自然災(zāi)害（比如地震、火山等）的頻繁發(fā)生，人們面臨的壓力（應(yīng)激）越來越大，有研究表明身兼多種角色于一身的女性，更容易受到應(yīng)激相關(guān)疾病的騷擾，其生殖健康方面，甚至?xí)l(fā)不可逆轉(zhuǎn)的不孕不育。隨著人們對應(yīng)激和應(yīng)激性疾病機制研究的深入，大量的動物應(yīng)激模型應(yīng)運而生，但是作為單純的心理應(yīng)激模型，各種現(xiàn)有的模型（比如電擊足部、束縛應(yīng)激等）都存在不同的缺陷，引發(fā)不少研究者的爭議

2、。此外，人們對心理應(yīng)激對雌性配子發(fā)育能力的研究涉及的也較少。因此，建立理想的心理應(yīng)激動物模型研究心理應(yīng)激對雌性卵母細(xì)胞發(fā)育能力的影響勢在必行。本研究基于以往所建立的捕食者應(yīng)激模型，排除了軀體應(yīng)激等其它應(yīng)激因素干擾的影響，添加了小鼠自由飲水和采食裝置，建立了一種單純的心理應(yīng)激模型。實驗主要集中于小鼠注射促性腺激素24h后，再應(yīng)激24h的研究，為保證較好的應(yīng)激持續(xù)性，采取了四次換貓制（即每隔6h換一次貓）。應(yīng)激過程中，利用高架十字迷宮（el

3、evated plus maze，EPM）立即測定小鼠捕食者應(yīng)激15min和注射促性腺激素24h后再應(yīng)激17h（即第三次換貓后5h）后，5min內(nèi)在EMP中的焦慮樣行為；并測定注射促性腺激素后應(yīng)激不同時間的小鼠血清皮質(zhì)醇水平。利用行為學(xué)和生理學(xué)兩方面相結(jié)合來確定所建立模型的有效性。同時實驗通過觀察捕食者應(yīng)激24h的小鼠卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)、孤雌激活、體外受精以及胚胎體內(nèi)外發(fā)育情況，研究單純心理應(yīng)激對小鼠卵母細(xì)胞發(fā)育能力的影響。結(jié)果如下：

4、
　　 ⑴捕食者（貓）應(yīng)激能夠使小鼠產(chǎn)生焦慮樣行為，這種焦慮樣行為在應(yīng)激過程中能夠較好的維持。
　　 ⑵捕食者應(yīng)激能夠引起小鼠非條件性的生理激素皮質(zhì)醇分泌增加，應(yīng)激1h后，皮質(zhì)醇濃度接近對照組的4倍（93.32±9.75 vs 25.76±1.53 ng/ml）；應(yīng)激12h時，實驗組與對照組差距進一步拉大，為對照組的4.5倍（70.16±9.10 vs16.57±3.03 ng/ml）；此后隨應(yīng)激時間的延長，應(yīng)激小鼠皮質(zhì)