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文檔簡介
1、【目的】研究防己諾林堿對三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的促進(jìn)凋亡、抑制PI3K/AKT/mTOR通路中PI3K、AKT、mTOR及磷酸化PI3K、AKT、mTOR蛋白的表達(dá),抑制荷瘤裸鼠腫瘤的生長,探討防己諾林堿對三陰性乳腺癌的抗腫瘤機(jī)制。
【方法】體外培養(yǎng)三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231,刃天青法檢測防己諾林堿對三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的抑制作用,計算其IC50,確定防己諾林堿的有效濃度;6孔板細(xì)胞劃痕
2、實驗檢測防己諾林堿抑制三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的遷徙能力;細(xì)胞流式技術(shù)檢測防己諾林堿促進(jìn)細(xì)胞的凋亡作用;Western Blot檢測PI3K/AKT/mTOR通路中PI3K、AKT、mTOR及磷酸化PI3K、AKT、mTOR蛋白的表達(dá),從而確定防己諾林堿對三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231蛋白表達(dá)的影響;荷瘤裸鼠實驗探討防己諾林堿對三陰性乳腺癌腫瘤生長的抑制作用。
【結(jié)果】防己諾林堿可以抑制三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA
3、-MB-231的活力,并測得IC50為6.25μmol/L;6孔板細(xì)胞劃痕實驗結(jié)果表明防己諾林堿還可以抑制MDA-MB-231細(xì)胞的遷徙能力;隨著濃度升高,抑制作用結(jié)果明顯;細(xì)胞流式技術(shù)表明防己諾林堿可以促進(jìn)MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡,且隨著濃度增加,凋亡率呈正相關(guān);Western Blot實驗結(jié)果表明防己諾林堿可調(diào)控PI3K/AKT/mTOR信號通路中PI3K、AKT、mTOR及磷酸化PI3K、AKT、mTOR蛋白的表達(dá),且表達(dá)結(jié)
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