長春花生物堿合成的化學(xué)調(diào)節(jié)、基因克隆及組培的研究.pdf

1、長春花是次生代謝研究中一種重要的模式植物。長春花能生產(chǎn)多種重要的藥用成分,其中雙吲哚生物堿長春堿和長春新堿是抗腫瘤藥物,單吲哚生物堿阿瑪堿和蛇根堿是高效降壓藥。 四十年來,人們一直研究用長春花細(xì)胞培養(yǎng)來生產(chǎn)這些藥用成分或它們的合成前體長春質(zhì)堿和文多靈,并且發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)子在細(xì)胞培養(yǎng)中可以作為一個重要的調(diào)節(jié)因子來促進(jìn)次生代謝產(chǎn)物的生成。因此,本論文中用代號為NAE-18的化學(xué)物質(zhì)對正常的細(xì)胞系和EMS誘導(dǎo)的細(xì)胞系分別進(jìn)行作用,研究結(jié)果表

2、明,這種化學(xué)物質(zhì)可以提高生物堿阿瑪堿的含量。 目前,通過遺傳操作來提高長春花的次生代謝產(chǎn)物的研究也越來越多。 本文摸索了長春花再生的系統(tǒng),用愈傷組織進(jìn)行再生已經(jīng)有了一定的突破,但是重復(fù)性不是很好。文中對轉(zhuǎn)基因受體材料進(jìn)行了選擇,包括秋水仙堿及綠色愈傷組織的培養(yǎng)。秋水仙堿已經(jīng)成功地誘導(dǎo)了四倍體。這些工作為遺傳操作在長春花中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。 最后,本文通過RT-PCR克隆了長春花吲哚生物堿合成的兩個關(guān)鍵基因str、