不同土壤粒徑條件下長春花CesA基因的克隆與表達規(guī)律研究.pdf

1、本實驗以長春花幼葉為材料，探討不同土壤粒徑下，長春花葉片中與細胞壁合成相關的纖維素合成酶基因(CesA)表達規(guī)律。不同的土壤粒徑對土壤空間及承載土壤溶液、水分、無機離子的影響不同。通過RT-PCR獲得了473bp的CesA基因cDNA片段,Northern blotting結果表明不同的土壤粒徑影響葉片中CesA基因的表達，在干旱脅迫條件相同的條件下，土壤粒徑為60％A+40％B和40％A+60％B時的CesA基因表達較強，而在其它土壤

2、粒徑條件下表達差別不明顯。此為，本研究分析了內源激素對纖維素合成酶基因的表達規(guī)律的影響，并進一步研究不同土壤環(huán)境下植物細胞壁的生物合成，及對培育抗土壤機械阻力的品種有重要的理論意義。 具體結果如下： 1．不同處理條件，土壤粒徑和土壤緊實度，以及土壤含水率不同。 2．以不同土壤粒徑調控下的長春花葉片為材料，用TRIZOL法提取RNA，通過RT- PCR法，獲得了473bp的CesA基因的cDNA片段(注冊號EF54

3、7376)，進行 Blast比對的結果表明：與桉樹的CesA4(DQ014508.1)和大麥的CesA3(AT483151.1)基因的同源性為99％。 3．運用靈敏度強，特異性高的RNA作為探針進行Northem雜交，探討不同的土壤粒徑條件下長春花葉片中細胞壁的纖維素合成酶基因的表達特征。結果表明：在相同的土壤粒徑下，干旱脅迫下的CesA基因的表達要比正常水分條件下弱；在土壤粒徑不同而干旱脅迫條件相同CesA基因表達不同，即在干