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文檔簡介
1、分類號UDC密級編號角方霜糾碩士學位論文cRGDsiVEGFR2分子抑制血管生成的體外藥效學研究Aninvitrostudyontheanti—angiogenicactivityofcRGDsiVEGFI匕molecule導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型論文提交日期覃乙芯季愛民教授藥劑學學術(shù)型2017年5月碩士學位論文cRGDsiVEGFR2分子抑制血管生成的體外藥效學研究碩士研究生：覃乙芯指導教師：季愛民教授摘要腫瘤生長依賴于新血管生成，當
2、腫瘤組織擁有獨立的血管供應，腫瘤細胞就獲得了轉(zhuǎn)移擴散的能力。RNA干擾(RNAinterference，RNAi)作為一項新興技術(shù)，被廣泛應用于惡性腫瘤的基因治療研究領域。本課題設計合成cRGDsiVEGFR2分子，考察分子體外生物學功能，探討其抑制血管生成的作用效果及作為腫瘤靶向治療藥物的可能性。方法1、原代人臍靜脈內(nèi)皮細胞模型的建立膠原酶消化法分離提取細胞，免疫熒光檢測VIII因子進行細胞鑒定，流式細胞術(shù)檢測CD31含量進行純度檢測
3、，并探索最佳的血清饑餓條件。2、cRGDsiRNA分子的合成cRGD通過linker與siRNA正義鏈5’端共價偶聯(lián)得cRGDsiRNA分子，分別用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)和反相高效液相色譜進行結(jié)構(gòu)鑒定和純度檢測。3、cRGD。siVEGFR2分子體外功能研究(I)血清穩(wěn)定性研究：siVEGFR2、cRGDsiv】jGFR2、cRGDsiNC分另U與鼠血清混勻孵育，瓊脂糖凝膠電泳后觀察條帶完整性。(2)細胞毒性研究：1000nM、2000n
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