父代糖尿病引起子代代謝紊亂的研究.pdf

1、目的：
　　流行病學(xué)研究表明，父親或母親患糖尿病是子代患糖尿病的重要危險(xiǎn)因素。母親患糖尿病及妊娠期合并糖尿病對(duì)子代代謝的影響已有系統(tǒng)和深入的研究，但父親患糖尿病對(duì)子代生長(zhǎng)發(fā)育及代謝的影響尚不明確。因此本課題考察了父代糖尿病所生子代的生長(zhǎng)發(fā)育及代謝情況，旨在明確父代糖尿病對(duì)子代生長(zhǎng)發(fā)育和代謝的影響及機(jī)制。
　　方法：
　　雄性SD大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(35 mg/kg)，選擇血糖持續(xù)高于16.7 mM低于26.0 mM

2、的動(dòng)物作為糖尿病模型，與正常雌鼠交配；子鼠出生后監(jiān)測(cè)體重、隨機(jī)血糖和空腹血糖；實(shí)施葡萄糖耐量、高胰島素正常血糖鉗夾實(shí)驗(yàn)；觀測(cè)體型；監(jiān)測(cè)攝食量。處死動(dòng)物后，收集血清和肝臟組織。血清檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)；肝臟組織進(jìn)行HE染色、油紅O染色、透射電子顯微鏡觀測(cè)、TG測(cè)定；Real-Time PCR檢測(cè)分析肝臟脂質(zhì)代謝關(guān)鍵因子乙酰輔酶a羧

3、化酶 alpha（Acc-a）、脂肪酸合酶1（Fasn-1）和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1（Srebp1）RNA的相對(duì)表達(dá)；Western blot檢測(cè)胰島素信號(hào)通路關(guān)鍵因子蛋白激酶 B(protein kinase B, PKB, Akt)和胰島素受體底物1(insulin receptor substrate1, Irs1)的磷酸化；肝臟全基因組甲基化分析。
　　結(jié)果：
　　父代糖尿病組大鼠血糖水平顯著高于對(duì)照組。與對(duì)照組相

4、比，糖尿病組子代體重明顯增加、葡萄糖耐量受損、攝食量增加，但兩組隨機(jī)血糖及空腹血糖未見(jiàn)明顯差異。血清生化指標(biāo)檢測(cè)顯示，與對(duì)照組相比，糖尿病子代組血清ALT、AST水平并無(wú)顯著變化，但TC、TG、LDL水平升高、HDL水平降低。糖尿病組子代肝臟細(xì)胞內(nèi)有大量脂質(zhì)堆積、肝臟TG含量明顯增多；糖尿病組子代肝臟細(xì)胞Srebp1相對(duì)表達(dá)明顯升高；透射電鏡觀察到糖尿病組子代肝臟細(xì)胞出現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張。老年期時(shí)，糖尿病子代葡萄糖耐量受損加重，胰島素信號(hào)通路