衣原體噬菌體衣殼蛋白Vp1對豚鼠結膜炎衣原體及沙眼衣原體的作用研究.pdf

1、沙眼衣原體泌尿生殖道感染是世界上最常見的性傳播疾病。隨著細菌耐藥性及持續(xù)感染問題的產(chǎn)生，沙眼衣原體感染的治療變得愈來愈棘手，加之衣原體的特殊生物學特性，臨床治療失敗的例子越來越多。衣原體疫苗的研究尚未取得滿意的結果。近年來，國內外的研究開始轉向衣原體噬菌體，我們前期的相關研究表明，作為第二個被發(fā)現(xiàn)的衣原體噬菌體，豚鼠結膜炎衣原體噬菌體phiCPG1的衣殼蛋白Vp1能抑制D、E型沙眼衣原體及臨床株的生長，因此，我們推測 Vp1蛋白可能具有

2、潛在的臨床應用價值。本研究旨在進一步探討 Vp1蛋白對鸚鵡熱衣原體標準株豚鼠結膜炎衣原體（GPIC）、沙眼衣原體標準株D， E，F(xiàn)，G，H，I，K以及L2株的作用。
　　[目的]探討衣原體噬菌體衣殼蛋白 Vp1對豚鼠結膜炎衣原體（GPIC）及D, E, F, G, H, I, K及L2這8型沙眼衣原體的作用，觀察其對豚鼠結膜炎衣原體及不同型沙眼衣原體的生長抑制情況。為臨床上解決沙眼衣原體的感染提供新的治療方向。
　　[方法]

3、用不斷優(yōu)化的重組質粒在大腸埃希菌內大量表達衣原體噬菌體 Vp1蛋白，收集、鑒定及純化。將純化后的 Vp1蛋白與豚鼠結膜炎衣原體及不同型的沙眼衣原體室溫孵育3小時，接種至單層致密Hela細胞(或McCoy細胞)中，在衣原體的培養(yǎng)過程中加入不同濃度的 Vp1蛋白，根據(jù)細胞生長曲線變化確定Vp1蛋白的最佳作用濃度，在衣原體的換液、離心、孵育過程中加入最佳作用濃度的 Vp1蛋白，免疫熒光或碘染色計數(shù)包涵體。同時采用液體培養(yǎng)基稀釋法檢測 Vp1蛋

4、白對其它病原體如金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎克雷伯桿菌、白色念珠菌生長的影響。
　　[結果]經(jīng)體外重組表達的衣原體噬菌體衣殼蛋白Vp1對豚鼠結膜炎衣原體及沙眼衣原體均有明顯的抑制作用，作用濃度為51.2ug/ml，其對豚鼠結膜炎衣原體的抑制率約為80.2％，沙眼衣原體標準株D,E,F,G,H,I,K及L2生長的抑制率分別約為82.7%，78.0%，83.6%，76.9%，69.8%，75.7%，79.2%，86.7%，這一結果暗示

5、 Vp1蛋白對沙眼衣原體各株具有普遍的抑制作用。Vp1蛋白對生殖道其它常見病原體如對金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌、鏈球菌及白色念珠菌的生長抑制作用不明顯。
　　[結論]本實驗室體外重組表達的衣原體噬菌體衣殼蛋白Vp1對豚鼠結膜炎衣原體及不同型的沙眼衣原體的生長均有明顯的抑制作用，而對其它病原體作用不明顯。
　　本實驗首次探索了衣原體噬菌體衣殼蛋白 Vp1對豚鼠結膜炎衣原體及不同型沙眼衣原體的作用。為臨床上沙眼衣原體感染的治