微透析方法檢測復合組織中二甲基亞砜的初步研究.pdf

1、目的：
　　在一定條件下，經(jīng)兔股動脈灌注入冷凍保護劑二甲基亞砜，通過微透析技術(shù)檢測其在斷肢不同部位的滲透質(zhì)量摩爾濃度，計算得出該條件下冷凍保護劑是否在目標部位達到有效保護濃度，為冷凍肢體再植有效使用冷凍保護劑提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　在室溫(20-24℃)、恒溫38℃、微透析加樣泵流速2.2μL/min的條件下，進行微透析體內(nèi)、外校正實驗，得出動物實驗相對回收率。取健康新西蘭大白兔15只，手術(shù)部位提前一天備皮，1

2、0％水合氯醛經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉，麻醉成功后，縫合固定大腿近端皮膚與肌肉組織，縫合平面近端離斷大腿肌肉，保護股動、靜脈，結(jié)扎小隱靜脈，向上貼骨剝離股骨與附著肌肉至髖關(guān)節(jié)，打開髖關(guān)節(jié)囊，離斷髖關(guān)節(jié)。靜脈留置針分別置入股動、靜脈，2-0縫合線捆扎固定，在兔生理溫度、壓力條件下，肝素鹽水(1.25wIU/500mlNS)經(jīng)股動脈灌注，至股靜脈回流液體清亮。微透析線性探針分別置入小腿前外側(cè)皮下組織和小腿后肌群，探針平衡15mins后，依照灌注液體

3、不同分為10%組、20%組和NS組，分別灌注10%、20%二甲基亞砜冷凍保護劑和生理鹽水，持續(xù)40mins，微透析探針每15mins收集一組，股靜脈回流液組分別在冷凍保護劑灌注后1、3、5、10、20、30、40、50mins手工收集。不同濃度組可得到皮下組、肌肉組和靜脈回流組三組樣品，結(jié)果經(jīng)冰點滲透壓儀檢測并處理后，進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果：
　　10%組皮下和肌肉組織的微透析回收液檢測值各樣品間無明顯變化，為298.5

4、±1.12mOsm/kg H2O和302.5±1.98mOsm/kg H2O，與對照組比較無統(tǒng)計學差異，而靜脈回流液中檢測到Me2SO濃度最高為5.746%v/v，其后進入平臺期；20%組的皮下組織和肌肉的微透析回收液中分別得到Me2SO濃度最高為8.932%v/v和9.996%v/v；靜脈回流液中檢測到 Me2SO濃度最高為18.360%v/v，三組數(shù)據(jù)在達到高峰后均進入平臺期。
　　結(jié)論：
　　在室溫(20-24℃)、斷