應(yīng)用DNA及同工酶等遺傳標(biāo)記檢測(cè)分析州河鯉的遺傳特性.pdf

1、州河鯉分布于天津市薊縣境內(nèi)的于橋水庫(kù)，是天津市地方野鯉。州河鯉有很多不同于其他鯉魚之處，如體形似草魚，體高與體長(zhǎng)比小(體高較小)、肉質(zhì)較好。本試驗(yàn)以州河里為主要試驗(yàn)材料，并以在我國(guó)廣泛養(yǎng)殖的建鯉和框鱗鏡鯉作為對(duì)照，進(jìn)行相關(guān)研究。以期為州河鯉種質(zhì)資源的開發(fā)與利用提供依據(jù)。 本研究應(yīng)用線粒體DNA的RFLP技術(shù)和同工酶技術(shù)對(duì)州河鯉、建鯉以及框鱗鏡鯉的遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。并對(duì)州河鯉進(jìn)行基本生物學(xué)性狀的測(cè)量、染色體的制備與計(jì)數(shù)以及血細(xì)胞大

2、小的測(cè)量。 1.應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增州河鯉(36尾)、建鯉(32尾)以及框鱗鏡鯉(38尾)的mtDNA的D-loop區(qū)段，得到約1.6kb長(zhǎng)度的擴(kuò)增片段。擴(kuò)增出的DNA片段使用13種核酸內(nèi)切限制酶進(jìn)行酶切，其中8種核酸內(nèi)切限制酶(AluI、Dra I、EcoR I、HaeⅢ、HapⅡ、HinfⅠ、TaqⅠ和XspⅠ)有酶切位點(diǎn)，4種核酸內(nèi)切限制酶(DraⅠ、HaeⅢ、TaqⅠ和XspⅠ)個(gè)體間存在變異。不同酶切結(jié)果組合后，共得到6

3、種單倍型。州河鯉中以單倍型Ⅲ為主，達(dá)91.37％，建鯉以單倍型Ⅵ為主，達(dá)81.25％；框鱗鏡鯉中單倍型Ⅱ占39.47％，單倍型Ⅲ占47.37％；州河鯉與框鱗鏡鯉間的Rogers遺傳距最小，為0.4080；州河鯉與建鯉間的為0.8440；框鱗鏡鯉與建鯉間的為0.6469，此結(jié)果表明建鯉與州河鯉、框鱗鏡鯉間的遺傳差異較大。 2.使用水平式淀粉凝膠電泳法，對(duì)采自天津地區(qū)的州河鯉、建鯉和框鱗鏡鯉三個(gè)群體進(jìn)行了AAT、α-GPD、 GPI

4、、IDH、MDH和PGM共6種同工酶以及肌漿蛋白(PROT)的電泳分析。檢測(cè)出12個(gè)基因座位，在州河鯉中存在變異的是α-GPD*、GPI*、MDH-2*、PGM*、PROT*，在建鯉群體中存在變異的是α-GPD*、GPI*和PGM*，在框鱗鏡鯉群體中存在變異是α-GPD*、GPI*、PGM*和PROT*。州河鯉、建鯉、框鱗鏡鯉的多態(tài)基因座位比例( P0.99)分別為41.67％、25.00％和33.33％，平均雜合度預(yù)期值(He)分別為

5、0.0449、0.0749、0.0518； PGM*可以作為區(qū)分三個(gè)群體的標(biāo)記基因座位，在州河鯉群體中*c/c基因型占85.71％，在建鯉群體中*b/c基因型占65.71％，在框鱗鏡鯉群體中*b/b基因型占56.67％。 3.用PCR的方法擴(kuò)增州河鯉、建鯉和框鱗鏡鯉的線粒體DNA的Cytb的部分區(qū)段，都擴(kuò)增出400 bp的條帶，沒有琵琶湖野鯉特有的280 bp片段出現(xiàn)，表明州河鯉和建鯉、框鱗鏡鯉同屬于歐亞鯉魚群體。州河鯉從地理分