同工酶技術(shù)和ISSR標(biāo)記在灰樹花菌株上應(yīng)用的研究.pdf

1、對灰樹花菌株的酯酶同工酶、多酚氧化酶同工酶、過氧化物酶同工酶、淀粉酶同工酶、蛋白、SDS變性蛋白的標(biāo)記方法進(jìn)行了研究，篩選出酯酶同工酶和過氧化物酶同工酶兩種標(biāo)記方法較適合灰樹花的遺傳分析。 研究了培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)天數(shù)、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基初始pH值、培養(yǎng)基中碳源、培養(yǎng)基中氮源、培養(yǎng)基中無機(jī)離子這些培養(yǎng)灰樹花菌絲的環(huán)境條件和營養(yǎng)條件對酯酶同工酶和過氧化物酶同工酶條帶產(chǎn)生的影響，并以正交設(shè)計(jì)研究了培養(yǎng)基營養(yǎng)組合的影響。最終表明，在25℃

2、下，以PDA綜合培養(yǎng)基(馬鈴薯20％；葡萄糖2％；磷酸二氫鉀0.25％；硫酸鎂0.15％；蛋白胨0.5％；瓊脂2％；維生素B1微量；pH自然)，平板培養(yǎng)15天，可獲得帶型最豐富、染色最清晰的酯酶同工酶和過氧化物酶同工酶。 對栽培灰樹花子實(shí)體不同時(shí)期和不同組織部位的酯酶同工酶和過氧化物酶同工酶進(jìn)行了研究。泰安灰樹花成菇的酯酶同工酶帶型最豐富，菇蕾的過氧化物酶同工酶帶型最豐富。三個(gè)栽培品種子實(shí)體都以菌蓋邊緣的酯酶和過氧化物酶的帶型最

3、為豐富。 對所有菌株的提取酶液進(jìn)行酯酶和過氧化物酶的電泳檢測共獲得51條酶帶，酯酶酶帶44條，Rf值(遷移率)在0.055-0.92之間，過氧化物酶酶帶7條，遷移率在0.034-0.46之間；通過NTSYSpc2.0軟件遺傳分析表明，兩兩菌株間相似系數(shù)在0.5882-1.0000之間；聚類分析顯示，在相似系數(shù)為0.84的水平上，可以將68個(gè)菌株劃分為11個(gè)類群。 以所有菌株為研究材料，用ISSR引物AC06、GT07、C