瘤背石磺（Onchidium struma）繁殖、胚胎及幼體發(fā)育研究.pdf

1、瘤背石磺(Onchidium　struma)隸屬于軟體動(dòng)物門(Mollusea)、腹足綱(Gastropoda)、肺螺亞綱(Pulmonata)、柄眼目(Stylommatophora)、石磺科(Onchidiidae)。通過(guò)野外采集不同體重石磺成體，解剖出性腺利用常規(guī)石蠟組織切片方法制片系統(tǒng)研究瘤背石磺的性腺發(fā)育規(guī)律及卵子與精子的發(fā)生過(guò)程；通過(guò)對(duì)產(chǎn)卵前后的瘤背石磺的生殖腺的組織切片方法進(jìn)一步明確瘤背石磺的獨(dú)特的生殖方式；利用活體和組織

2、切片相結(jié)合的方法，系統(tǒng)闡釋了瘤背石磺胚胎及幼體的發(fā)育規(guī)律，尤其是內(nèi)部器官的變化過(guò)程；同時(shí)在實(shí)驗(yàn)室條件下初步篩選出適合瘤背石磺幼體生長(zhǎng)和存活的餌料。 1、瘤背石磺性腺發(fā)育規(guī)律``利用組織學(xué)方法研究了瘤背石磺體重(2-28 g)與性腺發(fā)育、性腺指數(shù)與肝胰腺指數(shù)或粘液腺指數(shù)間的關(guān)系，不同體重瘤背石磺性腺內(nèi)各期生殖細(xì)胞的組成與比例以及瘤背石磺卵子和精子發(fā)生的規(guī)律。結(jié)果表明： (1)瘤背石磺的性腺指數(shù)有隨體重增加而增加的特點(diǎn)：10

3、 g以上個(gè)體性腺指數(shù)達(dá)到最高且基本無(wú)變化；不同體重瘤背石磺性腺指數(shù)與肝胰腺指數(shù)和粘液腺指數(shù)有明顯的正相關(guān)性(P<0.05)； (2)6 g以下組的瘤背石磺性腺濾泡管內(nèi)未發(fā)現(xiàn)有雌性生殖細(xì)胞，6 g以上組的性腺濾泡管內(nèi)雄性與雌性生殖細(xì)胞并存； (3)所有瘤背石磺個(gè)體性腺內(nèi)均有精子分布，6 g以下個(gè)體雄性生殖細(xì)胞組成以次級(jí)精母細(xì)胞為主，而6 g以上個(gè)體則以精子為主；6 g以上組的雌性生殖細(xì)胞成熟程度隨體重增加有明顯增加，其中6

4、-8 g以卵原細(xì)胞為主(57％)，8_10 g開(kāi)始出現(xiàn)外源性卵黃合成期的卵母細(xì)胞，10-14 g時(shí)的外源性卵黃合成期的卵母細(xì)胞約為69％，且開(kāi)始出現(xiàn)成熟卵母細(xì)胞。 (4)卵子發(fā)生共經(jīng)歷6期：分別為卵原細(xì)胞期、卵黃合成前卵母細(xì)胞期、內(nèi)源性卵黃合成期、外源性卵黃合成期、近成熟期和成熟卵母細(xì)胞期，成熟卵母細(xì)胞直徑約為(59.36±3.88)μm。精子發(fā)生經(jīng)歷精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞、精子細(xì)胞和精子共5個(gè)階段，精子長(zhǎng)約(52

5、.44±20.65)μm。石磺體重與性腺發(fā)育程度密切相關(guān)，10 g以上的個(gè)體可做為親本使用。 2、瘤背石磺產(chǎn)卵前后生殖腺的組織學(xué)的變化對(duì)瘤背石磺納精囊、受精囊以及產(chǎn)卵前后兩性腺、蛋白腺以及粘液腺的進(jìn)行組織學(xué)觀察。同時(shí)發(fā)現(xiàn)并比較排出體外卵莢的活體及組織切片形態(tài)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)： (1)納精囊中儲(chǔ)存有大量成熟精子，其作用應(yīng)為當(dāng)瘤背石磺個(gè)體較小并產(chǎn)生精子時(shí)儲(chǔ)存精子，待卵子成熟后再與其受精。 (2)瘤背石磺產(chǎn)卵后兩性腺中部腺泡

6、排空，剩余少量處于小生長(zhǎng)期的卵細(xì)胞。而位于兩性腺邊緣的腺泡則了充滿了處于大生長(zhǎng)期的卵細(xì)胞，且腺泡形態(tài)飽滿致密。推測(cè)腺泡的發(fā)育應(yīng)為有邊緣向中央遷移，當(dāng)中央腺泡卵細(xì)胞被排除后，周圍的腺泡向中央推進(jìn)，其中卵細(xì)胞迅速生長(zhǎng)成為成熟卵子，為下次排卵做準(zhǔn)備。 (3)瘤背石磺粘液腺中含有大量嗜堿性物質(zhì)，與排出體外的卵莢中的卵周液類似。粘液腺由嗜酸性和嗜堿性兩種區(qū)域組成，含有大量分泌細(xì)胞。 (4)推測(cè)瘤背石磺的生殖過(guò)程為：雄性生殖細(xì)胞成熟

7、后儲(chǔ)存在納精囊中。當(dāng)兩性腺中卵細(xì)胞成熟后，通過(guò)輸卵管排入受精囊，然后進(jìn)行交配行為。同時(shí)，大量的卵蛋白液進(jìn)入受精囊，包裹受精卵，經(jīng)過(guò)粘液腺的分泌的粘液再次包裹后形成卵莢并粘結(jié)成卵塊后發(fā)生產(chǎn)卵行為。 3、瘤背石磺胚胎和幼體發(fā)育在水溫27～29℃、氣溫27～31℃和海水鹽度為16的環(huán)境條件下人工孵化瘤背石磺的卵塊。對(duì)胚胎和幼體進(jìn)行活體顯微拍照和組織學(xué)研究。結(jié)果表明：根據(jù)早期發(fā)育的形態(tài)變化將其劃分為胚胎發(fā)育和幼蟲(chóng)發(fā)育兩個(gè)階段。瘤背石磺的

8、胚胎發(fā)育具備典型的不等全裂、螺旋卵裂特征。組織切片可明顯觀察到卵周液的存在。瘤背石磺幼蟲(chóng)為典型的腹足綱面盤幼蟲(chóng)形態(tài)；活體可觀察到明顯的卵黃囊?？砂l(fā)現(xiàn)卵黃囊在孵化后的0-7天顯著縮?。M織切片可發(fā)現(xiàn)，瘤背石磺幼體消化道發(fā)育十分迅速，可觀察到明顯的食道、胃及消化腺。證明出膜的幼蟲(chóng)已具有消化吸收的能力?？梢?jiàn)瘤背石磺的幼體的早期發(fā)育是混合性營(yíng)養(yǎng)。 4、不同餌料及配伍對(duì)瘤背石磺幼體的影響``利用六種餌料及配伍A微綠球藻(Nannochl

9、orisoculat)：B綠色巴夫藻(Pavlova viridis)；C球等鞭金藻(Isochrysis galbana)；D微綠球藻+綠色巴夫藻(N．orisoculata+P.viridis)：E綠色巴夫藻+球等鞭金藻(P.viridis+L galbana)；F微綠球藻+球等鞭金藻(N.orisoculata+I.galbana)；微綠球藻+球等鞭金藻的配伍對(duì)于石磺幼體的存活最具積極的作用。這兩種藻類DHA、EPA含量的互補(bǔ)為瘤