中華青鳉胚胎發(fā)育及胚胎低溫保存的初步研究.pdf

1、本研究對中華青鳉(Oryzias latiipes sinensis)在28℃受精卵發(fā)育做了連續(xù)跟蹤觀察,并確定了發(fā)育時期和每一發(fā)育時期經(jīng)歷時間,描述了每個時期的發(fā)育狀況。然后對中華青鳉胚胎的三個時期發(fā)眼期,十六肌節(jié)期,脊索空泡化完成期做了兩種溶液,四種保存方式的低溫(0-4℃)15天保存,記錄了胚胎存活率。后續(xù)又將青鳉胚胎在28℃下恒溫孵化,記錄孵化率。最后將孵出的正常仔魚數(shù)與樣本中胚胎總數(shù)做對比,得出了經(jīng)過低溫保存15天后28℃孵化

2、的正常仔魚率研究內(nèi)容主要包括:
　　1中華青鳉胚胎發(fā)育(28℃)過程
　　本試驗對中華青鳉受精卵的發(fā)育做了連續(xù)觀察,并對發(fā)育時期做了細(xì)分和描述。結(jié)果表明:中華青鳉受精卵經(jīng)過了六大時期(卵裂時期、囊胚形成時期、原腸胚形成時期、神經(jīng)胚形成時期、器官形成時期、孵化期),32個具體發(fā)育時期才會孵出仔魚。
　　2四種方式低溫(4℃)保存青鳉胚胎試驗
　　本實驗對三個不同發(fā)育時期(發(fā)眼期,十六肌節(jié)期,脊索空泡化完成期)的中華

3、青鳉胚胎做了低溫15天保存,結(jié)果表明:在只使用聚維酮碘保護液時,三個時期的平均胚胎存活率為75.0％,71.1%,62.5%,保存結(jié)果較好的是發(fā)眼期在0.5mg/l達到84.4%,十六期在0.5mg/l和1.0mg/l達到82.2%。使用添加泥炭土的聚維酮碘保護液時,三個時期的平均胚胎存活率為86.0%,84.3%,74.5%,保存結(jié)果較好的是發(fā)眼期和十六期在0.5mg/l水平上達到88.9%,86.7%。只使用孔雀石綠保護液時,三個時

4、期的平均胚胎存活率為74.5%,68.3%,72.7%,發(fā)眼期保存結(jié)果較好,十六期在1.0mg/l水平上達到86.7%。使用添加泥炭土的孔雀石綠保護液時,三個時期的平均胚胎存活率為84.3%,79.0%,80.5%。
　　3低溫保存恒溫(28℃)孵化胚胎試驗
　　本試驗為低溫保存后的后續(xù)試驗,將存活的青鳉胚胎從低溫保存中的樣品袋中取出,放入裝有純凈水的培養(yǎng)皿中28℃水浴鍋中恒溫培養(yǎng),直至孵化出膜,記錄孵化結(jié)果。結(jié)果表明:低溫

5、保存時只使用聚維酮碘保護液的三個時期胚胎平均孵化率為73.7%,73.0%,79.1%,孵化結(jié)果較好的是發(fā)眼期在0.5mg/l水平達到84.4%,十六肌節(jié)期在0.5mg/l和1.0mg/l水平達到75.7%,78.4%。低溫保存時添加泥炭土的聚維酮碘保護液的三個時期胚胎平均孵化率為79.5%,74.0%,79.1%,發(fā)眼期在0.5mg/l水平上能達到92.5%孵化率。低溫保存時只使用孔雀石綠保護液的三個時期胚胎平均孵化率為73.3%,7

6、3.8%,66.2%,十六肌節(jié)期在2.0mg/l水平上達到87.9%的孵化率。低溫保存時添加泥炭土的孔雀石綠保護液的三個時期胚胎平均孵化率為74.5%,78.1%,69.3%,發(fā)眼期在1.0mg/l,2.0mg/l水平的孵化率為87.5%,82.5%。十六期的三個處理組孵化率能82.1%,94.3%,84.4%。脊索期在1.0mg/l,2.0mg/l水平的孵化率分別為71.8%,78.4%。
　　4孵化青鳉胚胎正常仔魚試驗

7、　　本試驗為青鳉胚胎在28℃恒溫孵化后體式顯微鏡下觀察胚胎的體型及內(nèi)臟發(fā)育狀況,記錄發(fā)育正常的仔魚結(jié)果。結(jié)果表明:低溫保存時只使用聚維酮碘保護液的三個時期胚胎正常仔魚率為54.0%,48.2%,48.3%,發(fā)眼期在0.5mg/l水平上的仔魚正常率為71.11%,十六期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上的仔魚正常率分別為62.2%,60.0%。脊索期中0.5mg/l,1.0mg/l水平上的仔魚正常率分別為62.2%,57.8%。低溫保

8、存時添加泥炭土的聚維酮碘保護液的三個時期胚胎正常仔魚率為67.1%,59.8%,56.8%。發(fā)眼期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上仔魚正常率分別為82.2%,77.8%。十六期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上仔魚正常率為77.8%,68.9%。脊索期在0.5mg/l,1.0mg/l水平上仔魚正常率都為64.4%。低溫保存時只使用孔雀石綠保護液的三個時期胚胎正常仔魚率為51.6%,45.5%,45.0%。發(fā)眼期在1.0mg/l

9、上仔魚正常率為71.1%。十六期在1.0mg/l水平上仔魚正常率為60.0%。低溫保存時添加泥炭土的孔雀石綠保護液的三個時期胚胎正常仔魚率為61.2%,57.7%,52.7%,三個時期的仔魚正常率無顯著差異。發(fā)眼期在1.0mg/l,2.0mg/l水平上仔魚正常率分別為77.8%,71.1%。十六期在1.0mg/l,2.0mg/l水平上仔魚正常率分別為71.1%,68.9%。脊索期的三個處理組仔魚正常率分別為53.3%,62.2%。60.