正交試驗優(yōu)化藥物萃取分離及檢測過程的研究.pdf

1、目的：優(yōu)化逆三相膜萃取煙葉中煙堿的提取和苦豆子中氧化槐果堿的的提取工藝。并激光光源和氙燈光源測定羅丹明B、維生素B2、熒光素和異硫氰酸熒光素含量，并進行比較2個光源的熒光強度。在酸性條件下，研究激光光源在線熒光光譜法雙氯芬酸鉀對羅丹明B熒光猝滅效應并討論其最佳優(yōu)化條件。用統(tǒng)計學方法比較新疆3個地區(qū)葡萄樹傷流液抗氧化能力。
　　方法：以煙堿萃取率為指標，考察了5個因素（酸濃度、堿濃度、循環(huán)時間、酸堿水相及有機相體積比和流速），選定最

2、佳工藝。以苦豆子為原料，在L16（45）單因素試驗的基礎上，采用正交試驗考察鹽酸濃度、氫氧化鈉濃度、提取時間和流速對氧化槐果堿提取工藝的影響，確定最佳提取工藝。首先通過用激光和氙燈光源在線熒光光譜法測定羅丹明B、維生素B2、熒光素和異硫氰酸熒光素的熒光強度，從而比較激光光源和氙燈光源產(chǎn)生的熒光強度，然后用激光以554nm為激發(fā)波長，以576nm為發(fā)射波長，測量雙氯芬酸鉀對羅丹明B熒光猝滅效應，空白液與試液熒光強度之差△F=F1-F0，根

3、據(jù)△F值與溶液中的雙氯芬酸鉀濃度呈正比關系，建立了一種熒光猝滅測定雙氯芬酸鉀的新方法。在單因素試驗的基礎上，采用正交試驗L9（33）考察雙氯芬酸鉀濃度、羅丹明濃度和pH值對羅丹明B熒光猝滅工藝的影響，確定最佳熒光猝滅工藝。采用統(tǒng)計分析方法分析新疆葡萄樹傷流液對·OH、O2-·、DPPH·、NO2-·、ABTS·這五種自由基的清除率。采用SPSS22.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果：煙葉中煙堿提取的最佳工藝條件為：酸濃度0.0

4、1％，堿濃度5%，循環(huán)時間25min，體積比（酸堿相∶有機相）2.5∶1，流速6mL/min，煙堿的提取率達到99.07%。正交試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，P＜0.05說明有顯著性的差異。最佳工藝條件進行3次重復實驗，結(jié)果已知煙堿提取率均值達到99.01%?？喽棺又醒趸惫麎A萃取工藝條件為：鹽酸濃度0.3%、氫氧化鈉濃度0.75mol/L、循環(huán)時間60min、體積比1∶1，流速6mL/min。方差分析結(jié)果顯示，除了流速以外，其他因素對萃取量之

5、間有顯著性的差異（P＜0.05）。激光光源和氙燈光源產(chǎn)生的熒光強度之間有顯著性差異（P＜0.05）。方差分析發(fā)現(xiàn)，3種因素對羅丹明B熒光猝滅值△F的影響存在顯著性差異（P＜0.05），最佳熒光猝滅工藝為雙氯芬酸鉀1.0×10-4mol/L，羅丹明濃度為1.2×10-6mol/L，pH值為2.5。單因素方差分析的結(jié)果顯示喀什木納格、吐魯番無核白和和田沙依巴克鄉(xiāng)紅葡萄葡萄樹傷流的5種自由基的清除能力均具有顯著性差異（P＜0.05），多重比較

6、已知羥自由基的清除能力和其他4種自由基的清除能力之間有顯著性的差異（P＜0.05），3個地區(qū)區(qū)葡萄樹傷流液5種自由基的清除能力之間不存在差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：該工藝操作簡單，萃取時間快，有機溶劑的消耗量少，易實現(xiàn)工業(yè)化，環(huán)境污染少，適用于煙葉中煙堿和苦豆子中氧化槐果堿的萃取，應用提供有一定的理論依據(jù)。而且為氧化槐果堿的綜合開發(fā)，利用定了一定的基礎。激光光源在藥物測定和熒光猝滅方面具有廣泛的使用價值，且工藝優(yōu)化的穩(wěn)定性良