溫度敏感性離子通道TRPV3在人類膝關(guān)節(jié)軟骨及滑膜組織中的表達(dá).pdf

1、目的：
　　檢測(cè)溫度敏感性離子通道TRPV3（thermosensitive ion channnel TRPV3）在人的膝關(guān)節(jié)滑膜及軟骨標(biāo)本中的分布，對(duì)人滑膜及軟骨組織中TRPV3所起的作用進(jìn)行研究。
　　方法：
　　集取各種年齡人正常的膝關(guān)節(jié)滑膜及軟骨分別10例和5例，膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨及滑膜組織各5例，每例軟骨組織均取自脛骨平臺(tái)，滑膜組織標(biāo)本均取自關(guān)節(jié)囊內(nèi)層，分裝在-70℃冰箱中。番紅“O”染色證實(shí)軟骨標(biāo)本有無退行性

2、變。首先分出5例OA軟骨標(biāo)本為OA組，取5例60-69歲為正常對(duì)照組，運(yùn)用Western blot、RT-PCR檢測(cè)正常和OA軟骨、滑膜中TRPV3有無表達(dá)分布及趨勢(shì)，再用免疫熒光和免疫組化方法測(cè)得TRPV3在正常及OA軟骨中分布表達(dá)以及趨勢(shì)。然后Western blot檢測(cè)正常軟骨標(biāo)本，所得條帶測(cè)灰度值，分30-39歲組和60-69歲組各5例，最后采取Western blot檢測(cè)TRPV3位于兩組軟骨中的趨勢(shì)。
　　結(jié)果：

3、>　　番紅“O”染色OA軟骨標(biāo)本顯微鏡觀察異常，色度及分層模糊，細(xì)胞之間著色較低。正常軟骨標(biāo)本染色均勻，淺層到深層染色由淺至深，顯示無退行性改變；RT-PCR、Western blot、免疫熒光與免疫組化方法在軟骨及滑膜組織中都有TRPV3表達(dá)，免疫熒光檢測(cè)TRPV3在軟骨細(xì)胞膜上有表達(dá)，且OA較正常軟骨表達(dá)較強(qiáng)；考馬斯亮藍(lán)染色控制上樣量，檢測(cè)TRPV3條帶灰度值分析，結(jié)果顯示TRPV3的表達(dá)量OA組高于正常對(duì)照組，t檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)意義（P