載脂蛋白A-I模擬肽對(duì)肥胖及肥胖合并心肌梗死大鼠心功能的影響及可能機(jī)制.pdf

1、目的:以肥胖和肥胖合并心肌梗死大鼠為模型，探討載脂蛋白A-I模擬肽(L-4F)上調(diào)血紅素氧合酶1(HO-1)對(duì)肥胖、肥胖合并心肌梗死大鼠心功能的影響及可能機(jī)制。
　　方法:本課題分為肥胖和肥胖合并心肌梗死兩部分。
　　第一部分:以7w齡雄性SD大鼠為研究對(duì)象，共40只，體質(zhì)量:160～180g，對(duì)照組以普通飼料喂養(yǎng)，肥胖組以高脂飼料(Research Diets，Inc，D12492)喂養(yǎng)，共8w。造模成功后，隨機(jī)分為4組:

2、1）Control+ABCT組;2）Obesity+ABCT組;3）Obesity+L-4F(HO-1誘導(dǎo)劑)組;4) Obesity+L-4F+SnMP（HO-1抑制劑）組。
　　第二部分:以7w雄性SD大鼠為研究對(duì)象，共60只，隨機(jī)分為5組，每組12只。在肥胖模型基礎(chǔ)上采用Jons法建立肥胖合并心肌梗死的大鼠模型。分組:1）Control+Sham+AB CT組;2)Obesity+Sham+ABCT組;3)Obesity+M

3、I+ABCT組;4)Obesity+MI+L-4F組;5)Obesity+MI+L-4F+SnMP組。
　　實(shí)驗(yàn)過程中監(jiān)測身長、體重、血糖等基礎(chǔ)指標(biāo);藥物干預(yù)8w后，進(jìn)行心臟超聲、血流動(dòng)力學(xué)檢測，觀察藥物干預(yù)前后心功能的變化情況，并留取血液和心臟標(biāo)本;采用HE和Masson染色等病理學(xué)方法，觀察心肌細(xì)胞橫徑、纖維化程度等指標(biāo);ELISA檢測法測定血清脂聯(lián)素(APN)、胰島素以及炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激及血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子;測定膽紅素、

4、膽固醇和甘油三酯等;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和Westernblot檢測相關(guān)基因蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:肥胖和肥胖合并心肌梗死模型的體重、血壓、血糖和胰島素均顯著升高，內(nèi)臟脂肪也明顯增多;反應(yīng)心功能的指標(biāo)LVEF、LVFS、±dp/dtmax等顯著降低;血清結(jié)果提示，CRP、TNFα、IL-6、MDA、ET-1等顯著升高;病理染色顯示，肥胖和肥胖合并心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞肥大、慢性炎癥反應(yīng)明顯，肥胖合并心肌梗死大鼠心肌梗死區(qū)域存在明

5、顯的炎癥反應(yīng)和纖維化;血清及心肌組織中的APN均顯示低表達(dá);肥胖和肥胖合并心肌梗死大鼠心肌組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平增加，Chop、Grp78、pPERK/PERK在心肌組織表達(dá)均顯著升高。L-4F上調(diào)HO-1表達(dá)后，體重、血壓、血糖和胰島素顯著降低，內(nèi)臟脂肪減少;心功能明顯好轉(zhuǎn);炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激和血管內(nèi)皮功能得到顯著改善;心肌組織的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平顯著下降。應(yīng)用HO-1的抑制劑SnMP明顯阻斷了L-4F上調(diào)HO-1后對(duì)心功能的改善作用，使炎癥

6、反應(yīng)、氧化應(yīng)激水平和血管內(nèi)皮功能均進(jìn)一步惡化，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激也更加明顯。
　　HO-1和APN在肥胖和肥胖合并心肌梗死大鼠心肌組織表達(dá)水平降低，Wnt10b、β-catenin和Shh在心肌組織表達(dá)也顯著降低，Wnt10b/β-catenin比值增大，PPARγ、C/EBPα和Peg1/mest顯著升高;應(yīng)用L-4F干預(yù)8w后，HO-1和APN在心肌組織的表達(dá)不同程度升高，Wnt10b、β-catenin和Shh表達(dá)也升高，PPARγ

7、、C/EBPα和Peg1/mest表達(dá)降低。HO-1的抑制劑SnMP與L-4F合用后，抑制了HO-1上調(diào)對(duì)各因子表達(dá)趨勢的作用。
　　結(jié)論: L-4F能夠上調(diào)肥胖和肥胖合并心肌梗死大鼠的HO-1-APN軸，降低體重和內(nèi)臟脂肪含量，減輕胰島素抵抗，并通過降低炎癥反應(yīng)、改善氧化應(yīng)激狀態(tài)和血管內(nèi)皮功能，抑制心肌重構(gòu)，進(jìn)而使肥胖和肥胖合并心肌梗死大鼠的心功能得到改善。L-4F發(fā)揮作用的機(jī)制可能為:上調(diào)HO-1和APN表達(dá)，導(dǎo)致心肌組織中P