脂肪間充質(zhì)干細胞對大鼠急性心肌梗死后心功能的影響及機制初步探討.pdf

1、背景:急性心肌梗死(AMI)后心肌細胞的損傷和壞死等病理刺激,促使心肌組織發(fā)生重構(gòu),導致心功能失代償及心衰的發(fā)生發(fā)展。目前的藥物及再灌注治療因其不能從根本上逆轉(zhuǎn)心肌重構(gòu),抑制后續(xù)心衰的發(fā)展,因此治療效果并不理想。心臟移植作為終末期心力衰竭的最終選擇,由于供體來源少,存在免疫排斥現(xiàn)象,在臨床應用中受到限制。干細胞治療作為再生醫(yī)學的重要內(nèi)容,因其具有自我更新、增殖及分化能力,為AMI后心衰的治療提供了新的希望。脂肪來源的間充質(zhì)干細胞(ADS

2、Cs)因其具有來源豐富且易獲得,患者無痛苦容易接受,無免疫排斥反應,體外可大量擴增,避免了倫理學問題等優(yōu)勢而成為較為理想的干細胞選擇。目前間充質(zhì)干細胞治療心血管疾病的機制說法眾多,應用間充質(zhì)干細胞治療AMI后心衰并對其治療機制進行探討,仍是值得我們關(guān)注和研究的。
　　目的:研究ADSCs對大鼠AMI后心功能及心室重構(gòu)的影響,并對其可能機制進行探討,為ADSCs在心血管領(lǐng)域臨床應用提供證據(jù)和思路。
　　方法:
　　一、A

3、DSCs的分離培養(yǎng)及鑒定。分離大鼠皮下脂肪,體外培養(yǎng)脂肪來源的間充質(zhì)干細胞,傳代擴增后,檢測細胞活性,鑒定其細胞表型,進行成骨、成脂誘導分化。
　　二、在體ADSCs移植治療大鼠AMI后心力衰竭。實驗用SD大鼠,隨機均分四組,各組8只。A組,shame組,造模過程中在大鼠左心耳下緣前降支處只穿線不結(jié)扎。B組,AMI組,制備AMI模型成功后,不予任何處理,直接關(guān)胸。C組,DMEM組,制備AMI模型后,用無菌微量注射器在梗死區(qū)邊緣心外

4、膜下分四點注射200ulDMEM,每點約50ul。D組,ADSCs組,同樣方法注射200ul(細胞數(shù)量約為1×106個/200ul)的ADSCs細胞懸液。術(shù)后7天各組大鼠行心臟超聲檢測,28天后各組大鼠再次行心臟超聲檢測及血流動力學檢測,取心臟組織行TTC染色,制備冰凍切片,行Masson染色及免疫熒光雙標染色(CD31為內(nèi)皮細胞的標記物,FSP-1為成纖維細胞的標志物)。
　　結(jié)果:ADSCs成功體外分離培養(yǎng),經(jīng)流式細胞儀鑒定C

5、D29、CD90、CD105陽性表達,CD31、CD45陰性表達,可向成骨、成脂細胞分化。大鼠AMI模型建立成功,胸導聯(lián)廣泛ST-T段抬高,梗死區(qū)顏色蒼白,心肌收縮力減弱。B、C、D組較A組心功能明顯減低,造模成功。D組較B、C組大鼠心功能明顯提高,血流動力學得到改善,且其梗死面積及纖維化程度減輕。熒光雙標染色可見 D組大鼠的心臟組織中雙染細胞數(shù)量較B組明顯減少。
　　結(jié)論:
　　1.本實驗成功分離ADSCs。
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