大鼠運動減肥過程中骨骼肌硫化氫含量及肌肉因子的變化.pdf

1、背景：目前，肥胖已成為影響社會發(fā)展及個體健康的主要公共衛(wèi)生問題。對現(xiàn)代人來說，營養(yǎng)過剩及體力活動減少是引起或加重肥胖的關(guān)鍵因素，因此運動在預(yù)防和控制肥胖中占據(jù)不可替代的作用。骨骼肌不僅是參與運動的主要器官，而且具有重要的內(nèi)分泌功能。骨骼肌在收縮過程中可分泌多種細胞因子，其中一些細胞因子除了在局部發(fā)揮作用外，還可分泌入血并進入其它組織和器官發(fā)揮其生理功能，這些細胞因子被稱為肌肉因子。IL-6作為最早發(fā)現(xiàn)的肌肉因子，其與能量代謝及運動的關(guān)系

2、已有不少報道，然而這些研究都是在正常健康狀態(tài)下進行，而對病理狀態(tài)下，如肥胖狀態(tài)下運動對IL-6的調(diào)節(jié)作用還無人研究。IL-15是一種新確定的肌肉因子，它主要由骨骼肌產(chǎn)生，可促進骨骼肌蛋白的積累，抑制其分解；此外，IL-15還可作用于脂肪組織內(nèi)的 IL-15受體進而調(diào)節(jié)脂肪的代謝，因此對治療肥胖及骨骼肌萎縮具有積極作用。有趣的是，運動對防治肥胖和骨骼肌萎縮也有重要作用，其機制是否與IL-15有關(guān)，目前還不清楚。硫化氫(H2S)是一種新近發(fā)

3、現(xiàn)的的氣體分子遞質(zhì)，其在代謝、炎癥、神經(jīng)和血管等多個方面所起到的調(diào)節(jié)作用已被越來越多的研究所證實。最近有文獻報道，外源性H2S具有改善脂質(zhì)代謝并減輕脂肪肝的作用。催化生成內(nèi)源性H2S的三種酶在大鼠骨骼肌中均有表達，而運動對骨骼肌內(nèi)源性H2S合成系統(tǒng)的影響還未見報道。
　　目的：檢測大鼠運動減肥過程中骨骼肌內(nèi)源性H2S合成系統(tǒng)及IL-6、IL-15基因表達的變化，為深入理解運動減肥的機制及H2S在運動減肥中所起的作用提供依據(jù)。

4、>　　方法：以SD雄性大鼠為研究對象，采用8周造模法建立大鼠肥胖模型并用中等強度跑臺運動對高脂膳食肥胖大鼠進行干預(yù)。實驗共分三組：正常對照組（CN組）、肥胖組（OB組）、肥胖加運動組（OB+EX組）。用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測各實驗組大鼠骨骼肌中H2S的含量；用RT-PCR、Real-time PCR和Western blotting實驗檢測大鼠骨骼肌中H2S合成相關(guān)酶胱硫醚γ裂解酶（CSE）、胱硫醚β合成酶（CBS）及3-巰

5、基丙酮酸硫基轉(zhuǎn)移酶（MST）的mRNA和蛋白表達情況；用免疫組化（IHC）實驗檢測大鼠骨骼肌中CSE的定位及蛋白表達量；用RT-PCR檢測骨骼肌中IL-6、IL-15的mRNA表達。
　　結(jié)果：ELISA結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中H2S含量明顯降低（P＜0.01）；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中H2S含量有所升高（P＜0.01）。Real-time PCR結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中CSE基因

6、的mRNA表達量明顯下降（P＜0.01），CBS基因的mRNA表達量也降低（P＜0.05）；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中CSE基因的mRNA表達量升高（P＜0.05）。Western blotting結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中CSE基因的蛋白表達量明顯下降（P＜0.01）；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中CSE基因的蛋白表達量明顯升高（P＜0.01）。IHC結(jié)果顯示，大鼠骨骼肌中 CSE蛋白主要定位于胞質(zhì)

7、內(nèi)，運動組大鼠骨骼肌中CSE蛋白表達量明顯升高。RT-PCR結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中IL-6基因的mRNA表達量明顯升高（P＜0.01），IL-15的mRNA表達量無變化；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中IL-6基因的mRNA表達量降低（P＜0.05），IL-15基因的mRNA表達量無明顯差異。
　　結(jié)論：⑴肥胖降低大鼠骨骼肌中H2S的含量，而中等強度運動使其升高，這可能與內(nèi)源性H2S合成酶CSE的規(guī)律性變