大鼠運(yùn)動(dòng)減肥過(guò)程中骨骼肌硫化氫含量及肌肉因子的變化.pdf

1、背景：目前，肥胖已成為影響社會(huì)發(fā)展及個(gè)體健康的主要公共衛(wèi)生問(wèn)題。對(duì)現(xiàn)代人來(lái)說(shuō)，營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩及體力活動(dòng)減少是引起或加重肥胖的關(guān)鍵因素，因此運(yùn)動(dòng)在預(yù)防和控制肥胖中占據(jù)不可替代的作用。骨骼肌不僅是參與運(yùn)動(dòng)的主要器官，而且具有重要的內(nèi)分泌功能。骨骼肌在收縮過(guò)程中可分泌多種細(xì)胞因子，其中一些細(xì)胞因子除了在局部發(fā)揮作用外，還可分泌入血并進(jìn)入其它組織和器官發(fā)揮其生理功能，這些細(xì)胞因子被稱(chēng)為肌肉因子。IL-6作為最早發(fā)現(xiàn)的肌肉因子，其與能量代謝及運(yùn)動(dòng)的關(guān)系

2、已有不少報(bào)道，然而這些研究都是在正常健康狀態(tài)下進(jìn)行，而對(duì)病理狀態(tài)下，如肥胖狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)對(duì)IL-6的調(diào)節(jié)作用還無(wú)人研究。IL-15是一種新確定的肌肉因子，它主要由骨骼肌產(chǎn)生，可促進(jìn)骨骼肌蛋白的積累，抑制其分解；此外，IL-15還可作用于脂肪組織內(nèi)的 IL-15受體進(jìn)而調(diào)節(jié)脂肪的代謝，因此對(duì)治療肥胖及骨骼肌萎縮具有積極作用。有趣的是，運(yùn)動(dòng)對(duì)防治肥胖和骨骼肌萎縮也有重要作用，其機(jī)制是否與IL-15有關(guān)，目前還不清楚。硫化氫(H2S)是一種新近發(fā)

3、現(xiàn)的的氣體分子遞質(zhì)，其在代謝、炎癥、神經(jīng)和血管等多個(gè)方面所起到的調(diào)節(jié)作用已被越來(lái)越多的研究所證實(shí)。最近有文獻(xiàn)報(bào)道，外源性H2S具有改善脂質(zhì)代謝并減輕脂肪肝的作用。催化生成內(nèi)源性H2S的三種酶在大鼠骨骼肌中均有表達(dá)，而運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌內(nèi)源性H2S合成系統(tǒng)的影響還未見(jiàn)報(bào)道。
　　目的：檢測(cè)大鼠運(yùn)動(dòng)減肥過(guò)程中骨骼肌內(nèi)源性H2S合成系統(tǒng)及IL-6、IL-15基因表達(dá)的變化，為深入理解運(yùn)動(dòng)減肥的機(jī)制及H2S在運(yùn)動(dòng)減肥中所起的作用提供依據(jù)。

4、>　　方法：以SD雄性大鼠為研究對(duì)象，采用8周造模法建立大鼠肥胖模型并用中等強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂膳食肥胖大鼠進(jìn)行干預(yù)。實(shí)驗(yàn)共分三組：正常對(duì)照組（CN組）、肥胖組（OB組）、肥胖加運(yùn)動(dòng)組（OB+EX組）。用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌中H2S的含量；用RT-PCR、Real-time PCR和Western blotting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠骨骼肌中H2S合成相關(guān)酶胱硫醚γ裂解酶（CSE）、胱硫醚β合成酶（CBS）及3-巰

5、基丙酮酸硫基轉(zhuǎn)移酶（MST）的mRNA和蛋白表達(dá)情況；用免疫組化（IHC）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠骨骼肌中CSE的定位及蛋白表達(dá)量；用RT-PCR檢測(cè)骨骼肌中IL-6、IL-15的mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：ELISA結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中H2S含量明顯降低（P＜0.01）；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中H2S含量有所升高（P＜0.01）。Real-time PCR結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中CSE基因

6、的mRNA表達(dá)量明顯下降（P＜0.01），CBS基因的mRNA表達(dá)量也降低（P＜0.05）；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中CSE基因的mRNA表達(dá)量升高（P＜0.05）。Western blotting結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中CSE基因的蛋白表達(dá)量明顯下降（P＜0.01）；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中CSE基因的蛋白表達(dá)量明顯升高（P＜0.01）。IHC結(jié)果顯示，大鼠骨骼肌中 CSE蛋白主要定位于胞質(zhì)

7、內(nèi)，運(yùn)動(dòng)組大鼠骨骼肌中CSE蛋白表達(dá)量明顯升高。RT-PCR結(jié)果顯示：與CN組相比，OB組大鼠骨骼肌中IL-6基因的mRNA表達(dá)量明顯升高（P＜0.01），IL-15的mRNA表達(dá)量無(wú)變化；與OB組相比，OB+EX組大鼠骨骼肌中IL-6基因的mRNA表達(dá)量降低（P＜0.05），IL-15基因的mRNA表達(dá)量無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論：⑴肥胖降低大鼠骨骼肌中H2S的含量，而中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)使其升高，這可能與內(nèi)源性H2S合成酶CSE的規(guī)律性變