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文檔簡(jiǎn)介
1、巖白菜(Bergenia purpurascens)為虎耳草科(Saxifragaceae)巖白菜屬(Bergenia)植物,廣泛分布于中國(guó)西藏、云南、四川等地。巖白菜是中國(guó)民間常用的中草藥,主要用于治療咳嗽、慢性支氣管炎、虛弱頭暈、吐血咯血、痢疾、白帶異常、腫毒等。為了全面系統(tǒng)地了解巖白菜的化學(xué)成分,并深入研究其藥用活性價(jià)值,本課題對(duì)巖白菜葉的乙醇提取物展開(kāi)了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究,希望從中發(fā)現(xiàn)具有較好藥理活性的化合物。
采用硅
2、膠柱層析,結(jié)合MCI、Sephadex LH-20等分離材料,從巖白菜葉的乙醇提取物中共分離得到25個(gè)化合物,根據(jù)其波譜特征以及理化性質(zhì),鑒定了包括一個(gè)新化合物在內(nèi)的25個(gè)化合物結(jié)構(gòu),它們分別為:蒲公英賽醇(Y1)、β-谷甾醇(Y2)、白樺脂酸(Y3)、ocimol(Y4)、巖白菜素(Y5)、胡蘿卜苷(Y6)、熊果苷(Y7)、山萘酚(Y8)、3β,5α-dihydroxy-15-cinnamoyloxy-14-oxolathyra-6Z
3、,12E-diene(Y9)、烏蘇酸(Y10)、對(duì)苯二酚(Y11)、齊墩果酸(Y12)、阿魏酸(Y13)、2α-羥基烏蘇酸(Y14)、對(duì)羥基苯甲酸(Y15)、原兒茶酸(Y16)、沒(méi)食子酸(Y17)、11-O-沒(méi)食子酰巖白菜素(Y18)、11-O-(4'-羥基苯甲?;?巖白菜素(Y19)、槲皮素(Y20)、ardimerin(Y21)、1-O-β-D-glucopyrano syl-2-methoxy-3-hydroxyl-phen-yl
4、ethene(Y22*)、葡萄糖(Y23)、蔗糖(Y24)、蘆丁(Y25)。這些化合物隸屬于萜類(二萜和三萜)、酚類、黃酮類、有機(jī)酸、甾體類及糖等類。其中,Y22*為一個(gè)新化合物,Y1,Y4,Y9,Y10,Y12,Y14,Y21為首次從巖白菜屬植物中分離得到。
采用MTT法測(cè)試了部分化合物和新化合物Y22*對(duì)MGC-803(人胃癌細(xì)胞)、T24(人膀胱癌細(xì)胞)、Hep-G2(人肝癌細(xì)胞)、NCI-H460(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)這
5、4種癌細(xì)胞細(xì)胞株的體外增殖作用,以化合物羥基喜樹(shù)堿為對(duì)照物,研究結(jié)果表明,相比較于其它已知化合物,新化合物Y22*具有最好的抑制活性,Y22*對(duì)MGC-803細(xì)胞的IC50值為18.10±1.15μM,對(duì)Hep-G2細(xì)胞的IC50值為20.93±1.07μM,對(duì)NCI-H460細(xì)胞的IC50值為17.69±1.17μM,對(duì)T24細(xì)胞具有最強(qiáng)的抑制作用,其IC50值為14.36±1.04μM。在此基礎(chǔ)上,研究了Y22*對(duì)T24細(xì)胞株的作用
6、機(jī)制。分別利用熒光染色法(Hoechst33258染色和AO/EB熒光染色法)與流式細(xì)胞分析(FITC AnnexinⅤ/PI雙染)實(shí)驗(yàn),證實(shí)了化合物Y22*主要通過(guò)誘導(dǎo)T24細(xì)胞的凋亡而抑制此癌細(xì)胞生長(zhǎng);采用ROS檢測(cè)實(shí)驗(yàn)對(duì)其誘導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行了進(jìn)一步的研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,加藥后增加了細(xì)胞間的ROS水平。另外,還采用Western blot檢測(cè)經(jīng)化合物Y22*處理后T24細(xì)胞中Caspase-3,Bax,Bcl-2蛋白水平的表達(dá),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表
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