嬰兒型雙歧桿菌防治小鼠過(guò)敏性哮喘及食物過(guò)敏的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分嬰兒型雙歧桿菌防治小鼠過(guò)敏性哮喘的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：研究嬰兒型雙歧桿菌（Bifidobacterium infantis，B.infantis）對(duì)過(guò)敏性哮喘的防治作用及相關(guān)免疫機(jī)制。
　　方法：將40只BALB/c雄性小鼠隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組、過(guò)敏性哮喘組、嬰兒型雙歧桿菌預(yù)防組和嬰兒型雙歧桿菌治療組。過(guò)敏性哮喘組、預(yù)防組和治療組在第7和14天腹腔注射卵清蛋白(ovalbumin，OVA)致敏，第22至28天以1

2、％OVA霧化激發(fā)建立哮喘模型，建模同時(shí)預(yù)防組第0至14天灌胃嬰兒型雙歧桿菌，治療組第15至28天灌胃嬰兒型雙歧桿菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，收集血清和肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid，BALF），完成BALF細(xì)胞計(jì)數(shù)和肺組織HE染色，ELISA法檢測(cè)OVA特異性IgE、IgG1、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13和IL-10的水平。
　　結(jié)果：（1）過(guò)敏癥狀：過(guò)敏性哮喘組小鼠激發(fā)后出現(xiàn)打噴嚏、煩躁不

3、安、食欲下降等癥狀，預(yù)防組和治療組霧化激發(fā)后癥狀較輕。（2）肺泡灌洗液細(xì)胞計(jì)數(shù)：與過(guò)敏性哮喘組比較，嬰兒型雙歧桿菌的預(yù)防組和治療組明顯減少。（3）肺組織HE染色：過(guò)敏性哮喘組小支氣管、肺泡內(nèi)都有大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；預(yù)防組和治療組肺組織炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減輕。（4）血清OVA特異性抗體水平：過(guò)敏性哮喘組OVA特異性IgG1和IgE顯著升高；預(yù)防組和治療組OVA特異性IgG1和IgE均明顯降低。（5）細(xì)胞因子水平：過(guò)敏性哮喘組肺泡灌洗液中IL

4、-13和IL-4水平明顯高于正常對(duì)照組，血清IL-10明顯低于正常對(duì)照組，預(yù)防組和治療組較過(guò)敏性哮喘組均明顯降低（P<0.05），過(guò)敏性哮喘組治療組明顯高于過(guò)敏性哮喘組，差異顯著（P<0.05）。
　　結(jié)論：（1）OVA過(guò)敏性哮喘組小鼠Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-13增多，Treg細(xì)胞因子IL-10減少，發(fā)生Th2/Treg免疫反應(yīng)失衡的過(guò)敏反應(yīng)。（2）嬰兒型雙歧桿菌可以改善過(guò)敏癥狀，減輕過(guò)敏小鼠的氣道炎癥，降低OVA特異性抗體

5、IgE和IgG1水平，其機(jī)制可能是通過(guò)抑制Th2細(xì)胞因子IL-4和IL-13的分泌，促進(jìn)Treg細(xì)胞因子IL-10的分泌來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫平衡。
　　第二部分嬰兒型雙歧桿菌防治小鼠食物過(guò)敏的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：研究嬰兒型雙歧桿菌（Bifidobacterium infantis，B.infantis）對(duì)食物過(guò)敏的防治作用及相關(guān)免疫機(jī)制。
　　方法：將40只BALB/c雄性小鼠稱(chēng)重，根據(jù)體重排序標(biāo)號(hào)，分為四組：正常對(duì)照組、

6、食物過(guò)敏組、嬰兒型雙歧桿菌預(yù)防組和嬰兒雙歧桿菌治療組。食物過(guò)敏組、預(yù)防組和治療組于第7、14和21天灌胃β-乳球蛋白（Beta-Lactoglobulin，BLG）致敏，第28天灌胃BLG激發(fā)1次。建模同時(shí)，預(yù)防組第1至21天灌胃嬰兒型雙歧桿菌，治療組第22至28天灌胃嬰兒型雙歧桿菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算增重結(jié)果，取小鼠空腸行HE染色，ELISA法檢測(cè)總IgE、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13和IL-10的水平。
　　結(jié)果：（

7、1）小鼠癥狀：BLG致敏及激發(fā)后，食物過(guò)敏組出現(xiàn)食欲減退、體重減輕、毛發(fā)失去光澤；預(yù)防組和治療組小鼠過(guò)敏癥狀不明顯。（2）增重情況：食物過(guò)敏組小鼠體重減輕，預(yù)防組和治療組體重增加，且治療組高于預(yù)防組。（3）空腸病理HE染色：食物過(guò)敏組空腸上皮下出現(xiàn)嚴(yán)重炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，腸粘膜上皮脫落；預(yù)防組和治療組炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度減輕。（4）血清總IgE水平：食物過(guò)敏組明顯升高，預(yù)防組和治療組較食物過(guò)敏組明顯降低，治療組低于預(yù)防組。（5）細(xì)胞因子水平：食物

8、過(guò)敏組IL-4和IL-13水平均明顯升高，預(yù)防組IL-4和IL-13明顯降低，治療組IL-13水平降低；食物過(guò)敏組IL-10水平降低，預(yù)防組、治療組和食物過(guò)敏組比較差異不顯著。
　　結(jié)論：（1）BLG食物過(guò)敏小鼠Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-13增多，Treg細(xì)胞因子IL-10減少，發(fā)生 Th2/Treg免疫反應(yīng)失衡的過(guò)敏反應(yīng)。（2）嬰兒型雙歧桿菌可以降低血清總IgE水平，減輕食物過(guò)敏小鼠空腸炎性浸潤(rùn)的程度，維持腸粘膜結(jié)構(gòu)正常，其