藍藻NdhM亞基的生理功能分析.pdf

1、藍藻NADPH脫氫酶(NDH-1)大約是20年前發(fā)現(xiàn)的一種光合膜蛋白復合體，參與呼吸，圍繞光系統(tǒng)Ⅰ(PSI)的循環(huán)電子傳遞(CET)以及CO2吸收等重要生理過程。最近，藍藻NDH-1復合體的研究獲得了許多重大成果，例如，人們鑒定到了一個位于NDH-1復合體OPS(Oxygenic Photosyntheisis-Specific)區(qū)域的新亞基--NdhS，并且發(fā)現(xiàn)它參與了CET。然而，除NdhL，NdhS外，其它OPS區(qū)域Ndh亞基(如

2、NdhM，N，O)的生理功能至今尚了解不夠。
　　 在藍藻細胞中，CET主要由NDH-1復合體(NDH-CET)和PGR5蛋白介導的(PGR5-CET)。為了篩選出參與NDH-CET活性相關的基因，本論文首先構建和獲得了△pgr5突變株。其次，在△pgr5突變株的背景下進行突變體文庫的篩選，我們篩選到兩株高光敏感的突變株。進一步研究發(fā)現(xiàn)，這一高光敏感表型與損傷NDH-CET的活性有關，并且突變的位點是同一個已知基因slr1623

3、，即NdhM亞基的編碼基因。再次，為了研究NdhM亞基的生理功能，我們分別構建和獲得了△ndhM單突變株和△ndhM/pgr5雙突變株。進一步研究發(fā)現(xiàn)，NdhM亞基的突變不影響NDH-1復合體的表達與組裝，以及NDH-CET。然而，在PGR5突變的背景下，NdhM蛋白的突變也不影響NDH-1復合體的表達與組裝，但重大地影響了NDH-CET的活性。最后，通過酵母雙雜交系統(tǒng)的分析，本論文發(fā)現(xiàn)NdhM蛋白和NdhK亞基存在蛋白-蛋白相互作用。