介孔分子篩固定木瓜蛋白酶的研究.pdf

1、木瓜蛋白酶作為被研究較早、較深入的酶，廣泛應(yīng)用于食品、工業(yè)、醫(yī)藥中。固定化是解決其易失活、熱穩(wěn)定性差等問題的有效方法，同時(shí)還能提高其對pH、溫度適應(yīng)性，并實(shí)現(xiàn)循環(huán)使用。
　　 本文選擇以介孔分子篩SBA-15為載體吸附固定木瓜蛋白酶。為了調(diào)控載體與木瓜蛋白酶之間的作用力的類型與強(qiáng)弱，對SBA-15進(jìn)行改性，合成了載體NH2-SBA-15、SH-SBA-15、COOH-SBA-15、IL-SBA-15、酸化SBA-15和Al/SB

2、A-15。受靜電作用影響，pH=7時(shí)，固載能力SBA-15>IL-SBA-15，COOH-SBA-15>SBA-15>NH2-SBA-15。
　　 首次考察了合成羧基改性分子篩時(shí)使用的酸化處理步驟對固定酶的影響，并排除這一因素，孤立地考察了羧基對固定酶的貢獻(xiàn)。在不同pH條件下考察了SBA-15、IL-SBA-15、COOH-SBA-15和酸化SBA-15四種載體固定木瓜蛋白酶的能力，發(fā)現(xiàn)在酶的等電點(diǎn)時(shí)固載率不一定最大，COOH-

3、SBA-15在pH=8.75和9時(shí)對酶有強(qiáng)烈的吸附作用(固載量大于400 mg/g)。并通過動(dòng)力學(xué)研究，得到了上述四種載體的吸附、脫附速率常數(shù)比值κ和單層飽和吸附量Q0。以水解酪蛋白反應(yīng)為探針，測試了固定化酶的活性。由于單層吸附有效地解決了多層吸附帶來的活性位點(diǎn)被掩蓋的問題，固定化酶的比活性大幅提高。而固定酶時(shí)的pH1值對于固定化酶的活性也是有影響的。相比于游離木瓜蛋白酶，以IL-SBA-15和COOH-SBA-15為載體的單層固定化酶