產(chǎn)纖溶酶地衣芽孢桿菌與中藥紅花相輔相成作用的研究.pdf

1、該項(xiàng)研究所利用的微生物為一株地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)C2-1 3,它不僅生長快、營養(yǎng)要求簡單,而且還能產(chǎn)生較強(qiáng)活性的纖溶酶和許多有利于中藥發(fā)酵炮制的酶,如:蛋白酶、糖苷水解酶、淀粉酶、脂肪酶等.該項(xiàng)研究利用中藥紅花與C2-1 3共發(fā)酵,其主要內(nèi)容包括:Ⅰ地衣芽孢桿菌C2-1 3的鑒定以及發(fā)酵條件優(yōu)化Ⅱ紅花對地衣芽孢桿菌生長和代謝的影響的研究Ⅲ地衣芽孢桿菌對紅花發(fā)酵炮制的研究Ⅳ發(fā)酵機(jī)理的初步研宄該項(xiàng)研究

2、的主要研究結(jié)果如下:Ⅰ C2-1 3分離自成都市屠宰場的污水中,以纖溶酶活為指標(biāo),利用全面反饋優(yōu)化實(shí)驗(yàn)技術(shù)對其發(fā)酵培養(yǎng)基成分和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化.實(shí)驗(yàn)結(jié)果是:蔗糖2.0﹪,酵母浸膏0.6﹪,K.H2PO40.8﹪,CaCl20.1﹪,MgSO4Cl20.5﹪,玉米粉0.5﹪初始pH10.0,接種量1.5﹪,裝量10﹪,39℃,180~200rpm培養(yǎng)36h.Ⅱ?qū)2-1 3與不同濃度的紅花共同培養(yǎng),生長曲線法衡量紅花對C2-13生長的影

3、響,以纖溶酶活為指標(biāo)衡量紅花對C2-13代謝的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果是:在0~50g/L濃度范圍內(nèi),紅花對C2-1 3的生長的影響經(jīng)歷了一個由促進(jìn)到抑制的過程,在0~30g/L的濃度范圍內(nèi),紅花對C2-13的生長有較強(qiáng)促進(jìn)作用且有明顯的量效關(guān)系.如果紅花濃度繼續(xù)增大,C2-13的生長受到抑制.與此同時纖溶酶活性變化也經(jīng)歷了一個先升高再降低的過程.Ⅲ對發(fā)酵炮制后紅花的主要藥效(活血化淤、抗氧化等)進(jìn)行了研究.實(shí)驗(yàn)結(jié)果是:經(jīng)C2-13發(fā)酵炮制后的紅

4、花其抗氧化(自由基氧化、肝脂質(zhì)過氧化)活性和活血化淤活性都有不同幅度提高.Ⅳ利用高效液相色譜法(HPLC)對C2-1 3與紅花共發(fā)酵機(jī)理進(jìn)行了研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果是:分別對一下五種樣品(Ⅰ)未經(jīng)C2-13發(fā)酵未加紅花的發(fā)酵液;(Ⅱ)經(jīng)過C2-13的發(fā)酵未加紅花的發(fā)酵液;(Ⅲ)未經(jīng)C2-1 3發(fā)酵加有30g/L紅花的發(fā)酵液;(Ⅳ )經(jīng)過C2-1 3發(fā)酵加有30g/L紅花的發(fā)酵液;(Ⅴ)30g/L的紅花水浸液進(jìn)行了HPLC檢測,發(fā)現(xiàn)紅花中有一個保