枯草芽孢桿菌LD-8547溶栓酶溶栓效果初步研究.pdf

1、隨著物質(zhì)生活水平的提高,血栓疾病也越來越威脅人類的健康和生命,并且會(huì)引發(fā)嚴(yán)重的后果。微生物溶栓酶是一類具有良好應(yīng)用前景的溶栓酶,不僅能夠大量生產(chǎn),還能彌補(bǔ)傳統(tǒng)溶栓劑的缺點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)室已從豆豉中分離出一株具有產(chǎn)高纖溶活性的溶栓酶的菌株,命名為枯草芽孢桿菌LD-8547。
　　 本實(shí)驗(yàn)經(jīng)過發(fā)酵、鹽析、透析、濃縮等步驟得到粗酶液,再用Sephadex G-100凝膠分子篩柱純化豆豉溶栓酶,得到分子量約為31 kDa的單一條帶,純化后測得

2、酶活為21750 U／mL。通過豆豉溶栓酶對(duì)優(yōu)球蛋白凝塊的溶解試驗(yàn),表明溶栓酶(469 U)能顯著溶解優(yōu)球蛋白凝塊,并具有劑量依賴性。
　　 通過對(duì)豆豉溶栓酶急性毒性的初步研究,結(jié)果表明小鼠灌胃給藥溶栓酶691586 U／Kg,發(fā)現(xiàn)給藥小鼠與空白對(duì)照組情況相似,兩周內(nèi)均無死亡,小鼠解剖后,各臟體比均與對(duì)照組無顯著差異,說明溶栓酶的口服灌胃LD50遠(yuǎn)大于691586 U／Kg。小鼠連續(xù)灌胃給藥豆豉溶栓酶一周,測定體內(nèi)出血時(shí)間、體外

3、凝血時(shí)間、全血塊及全血漿凝塊溶解作用。結(jié)果表明,溶栓酶(4412 U)對(duì)小鼠出血、凝血時(shí)間有一定延長作用,溶栓酶(8200 U)能明顯提高血塊的溶解率,而溶栓酶(4100 U)能明顯提高血漿凝塊的溶解率,并隨劑量的提高而作用加強(qiáng)。
　　 通過角叉菜膠誘發(fā)小鼠尾部血栓及兔頸動(dòng)脈血栓的溶解試驗(yàn),表明豆豉溶栓酶(2051 U)對(duì)小鼠尾靜脈血栓形成平均長度有一定影響,并隨劑量增大抑制血栓形成的作用增強(qiáng)。溶栓酶(1035 U／kg)對(duì)兔頸