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文檔簡介
1、本研究旨在探究小型豬復合麻醉劑(XFM)及賽拉嗪對大鼠中樞神經系統(tǒng)大腦皮層、小腦、腦干、丘腦、海馬五個腦區(qū)c-fos、c-jun基因表達的影響,藉以探討XFM及賽拉嗪的麻醉機理,分析藥物作用在細胞內基因表達水平的調控機制及XFM和賽拉嗪在中樞神經系統(tǒng)的作用部位,為更好地指導藥物臨床應用和研制新型安全高效的麻醉復方制劑奠定理論基礎。
將114只健康SD大鼠,隨機分為空白對照組(B組)、生理鹽水對照組(C組)、XFM麻醉組(H
2、組)和賽拉嗪組(X組),B組不給藥,C組腹腔注射生理鹽水,H組腹腔注射XFM麻醉,X組腹腔注射與XFM合劑中相同用量的賽拉嗪。除B組外,C、H、X組分為6個亞組:麻醉誘導期(Ⅰ期)、翻正反射消失(Ⅱ期)、翻正反射消失后15min(Ⅲ期)、翻正反射消失后35min(Ⅳ期)、翻正反射恢復(Ⅴ期)、恢復直線爬行(Ⅵ期)。各組大鼠在對應的時間點斷頭處死,分離大腦皮層、小腦、腦干、丘腦和海馬,并提取各腦組織RNA和蛋白質,用實時熒光定量PCR法和
3、免疫印跡法檢測各腦組織樣品c-fos、c-jun基因mRNA含量和蛋白含量。
試驗結果表明:(1)C組大鼠大腦皮層、小腦、腦干、丘腦及海馬c-fos和c-jun基因表達無顯著變化(2)H組上述腦區(qū)c-fos mRNA轉錄量逐漸升高,丘腦在Ⅳ期達到最高,其余各腦區(qū)在Ⅲ期達到最高,在麻醉蘇醒過程中c-fos mRNA表達下調,上述腦區(qū)c-fos蛋白在麻醉過程中表達量上調,在麻醉蘇醒后(Ⅵ期)c-fos蛋白表達量下降;(3)H組
4、上述腦區(qū)c-jun mRNA表達量升高,Ⅲ期達到最高,在麻醉蘇醒過程中表達下降,上述腦區(qū)c-jun蛋白表達量上升,Ⅵ期表達下降;(4)X組上述腦區(qū)c-fos mRNA表達量上升,主要在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ期明顯升高,Ⅵ期下降至接近對照組水平,上述腦區(qū)c-fos蛋白表達逐漸升高,而在Ⅴ、Ⅵ期表達下降,X組c-fos表達水平較XFM組表達水平低;(5)X組上述腦區(qū)c-junmRNA表達上調,而在Ⅴ、Ⅵ期出現下降趨勢;上述腦區(qū)c-jun蛋白表達量也
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