癇能轉(zhuǎn)道對(duì)青霉素致癇大鼠海馬c-fos、c-jun表達(dá)的影響.pdf

1、本文研究目的：通過(guò)在青霉素致癇大鼠海馬置入引導(dǎo)電極，觀察癇能轉(zhuǎn)道后大鼠行為學(xué)、腦電圖及海馬 c-fos、c-jun表達(dá)的變化，明確癇能轉(zhuǎn)道對(duì)青霉素致癇大鼠發(fā)作的影響及其機(jī)制。 方法：采用大鼠海馬內(nèi)微注射青霉素制備急性癇性發(fā)作模型(注射點(diǎn)均為右側(cè)海馬)，將36只S．D大鼠，隨機(jī)分為六組，每組6只，分別為： ①模型組 (A)：建立青霉素致癇模型，致癇灶不置入引導(dǎo)電極。 ②自體腦外轉(zhuǎn)道組 (B)：建立青霉素致癇模型，置

2、引導(dǎo)電極于實(shí)驗(yàn)大鼠腦內(nèi)致癇灶(右側(cè)海馬CA3區(qū))，外接自體肌肉組織。 ③自體腦內(nèi)轉(zhuǎn)道組 (C)：建立青霉素致癇模型，置引導(dǎo)電極于實(shí)驗(yàn)大鼠腦內(nèi)致癇灶(右側(cè)海馬CA3區(qū))，通過(guò)導(dǎo)線及另一引導(dǎo)電極接左側(cè)海馬CA3區(qū)。 ④異體轉(zhuǎn)道直接致癇組 (D1)：建立青霉素致癇模型，置引導(dǎo)電極于腦內(nèi)致癇灶(右側(cè)海馬CA3區(qū))，外接異體轉(zhuǎn)道間接致癇組大鼠右側(cè)海馬CA3區(qū)。 ⑤異體轉(zhuǎn)道間接致癇組 (D2)：不建立青霉素致癇模型，右側(cè)海馬

3、CA3區(qū)置入引導(dǎo)電極，外接直接致癇組大鼠導(dǎo)出電極。 ⑥對(duì)照組 (F)：不建立青霉素致癇模型，僅右側(cè)海馬CA3區(qū)置入孤立引導(dǎo)電極。 6組大鼠分別于注藥后2h、3h、4h作行為學(xué)評(píng)估，記錄每只大鼠癇性發(fā)作次數(shù)及癇性發(fā)作Racine分級(jí)，并于致癇后2h進(jìn)行腦電圖記錄。致癇后4h取大鼠腦標(biāo)本，行冰凍切片，用免疫組化法觀察雙側(cè)海馬 c-fos、c-jun的表達(dá)變化，所得灰度值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1．行為學(xué)比較

4、： 1．1 除對(duì)照組無(wú)癇性發(fā)作外，其他各組癇性發(fā)作形式以Racine分級(jí)四級(jí)——多肢抽動(dòng)伴傾倒為主； 1．2注藥后2h、3h、4h，各組發(fā)作頻率逐漸減低，(P<0.05)：各實(shí)驗(yàn)組大鼠癇性發(fā)作次數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P>0.05)；②當(dāng)D1與D2的電極經(jīng)導(dǎo)線相連接5—10min后，D2組出現(xiàn)類似于D1組的癇性癥狀發(fā)作，每次發(fā)作緊跟D1組大鼠之后，頻率基本相同，僅程度稍輕。至觀察結(jié)束(注藥后4h)，D2組大鼠發(fā)作仍未停止，

5、而F組沒(méi)有觀察到癇性發(fā)作。 2．腦電圖比較： 2．1 F 組無(wú)癇性EEG發(fā)作； 2．2 B組較A組2h點(diǎn)EEG放電次數(shù)減少，P<0.05； 2．3 D1與D2組2h點(diǎn)EEG放電次數(shù)無(wú)顯著差別，P>0.05。 3．免疫組化灰度值比較： 3．1 引導(dǎo)電極置入后各干預(yù)組注藥側(cè)c-fos、c-jun表達(dá)均低于A組，P<0.05，可以認(rèn)為，引導(dǎo)電極的置入下調(diào)了 c-fos、c-jun的表達(dá)，引導(dǎo)電極

6、對(duì)大鼠癇性發(fā)作有干預(yù)作用。 3．2 C組注藥側(cè)和未注藥側(cè)海馬均見(jiàn) c-fos、c-iun表達(dá)，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可以認(rèn)為，癇性電能可能通過(guò)引導(dǎo)電極轉(zhuǎn)道至未注藥側(cè)，上調(diào)了未注藥側(cè)海馬 c-fos、c-jun表達(dá)。 3．3 D1組與D2組右側(cè)海馬c-fos、c-jun表達(dá)差異無(wú)顯著性，P>0.05；D2組右側(cè)海馬c-fos、c-jun表達(dá)均強(qiáng)于F組，P<0.05。可以認(rèn)為：癇性電能可能通過(guò)引導(dǎo)電極轉(zhuǎn)道至對(duì)側(cè)海馬

7、或異體試驗(yàn)大鼠腦內(nèi)，上調(diào)腦內(nèi)海馬區(qū)c-fos、c-jun表達(dá)，F(xiàn)組僅置入引導(dǎo)電極后 c-fos、c-jun表達(dá)不明顯。 3．4 B道、D1、D2組及A組右側(cè)c-fos、c-jun表達(dá)強(qiáng)于同組未注藥側(cè)，P<0.05?？梢哉J(rèn)為：試驗(yàn)大鼠雙側(cè)海馬 c-fos、c-jun表達(dá)存在差異。 結(jié)論： 1．金屬電極在致癇灶內(nèi)的置入，在一定程度上下調(diào)了海馬 c-fos、c-jun 的表達(dá)，其機(jī)制可能與轉(zhuǎn)道癇性電能，抑制癇性放電在腦