復(fù)方雙苓止瀉散對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的療效及熱休克蛋白70表達(dá)的影響.pdf

1、目的：用復(fù)方雙苓止瀉散灌胃治療葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎(UC)，并檢測(cè)結(jié)腸組織中熱休克蛋白70表達(dá)的變化，探討該藥對(duì)UC的治療作用及機(jī)制。
　　方法：取90只清潔級(jí)SD大鼠，從中隨機(jī)取10只作為正常對(duì)照組(NC)，其余80只采用右旋葡聚糖硫酸鈉(Dextran sulfate sodium，DSS)建立大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，通過(guò)觀察大鼠的一般情況變化及血便等癥狀來(lái)判斷大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型建立是否成功。模型建立后

2、，把80只SD大鼠隨機(jī)分為8組，每組10只，分別為：DSS模型3天組(Dextran sulfatesodium model Three days group，DT group)、DSS模型6天組(Dextransulfate sodium model Six days group，DS group)、DSS模型生理鹽水3天組(Salin model Three days group，ST group)、DSS模型生理鹽水6天組(Sal

3、inmodel Six days group，SS group)、復(fù)方雙苓止瀉散3天組(compoundshuang-ling antidiarrhea powder Three days treatment group，CT group)、復(fù)方雙苓止瀉散6天組(compound shuang-ling antidiarrhea powder Six daystreatment group，CS group)、萬(wàn)鑫母仔快康3天組(Wan

4、-xin-mu-zai-kuai-kang Three days group，WT group)和萬(wàn)鑫母仔快康6天組(Wan-xin-mu-zai-kuai-kang Six days group，WS group)。實(shí)驗(yàn)治療過(guò)程中每日觀察大鼠的活動(dòng)、進(jìn)食等一般情況以及體重、稀便、糞便隱血情況，計(jì)算各組大鼠疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分[1]。然后分別于3天、6天取時(shí)間相對(duì)應(yīng)組大鼠的結(jié)腸組織標(biāo)本，各組標(biāo)本行HE染色，鏡下觀察各組大鼠結(jié)腸組織

5、的病理變化，評(píng)估組織學(xué)損傷情況，并應(yīng)用免疫組化染色、Western-blot、RT-PCR等實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)各組大鼠結(jié)腸組織中HSP70的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠的一般狀況
　　正常對(duì)照組大鼠體重增加、大便正常、飲食活動(dòng)正常；DSS模型組和生理鹽水組大鼠體重減輕、肉眼血便、少食懶動(dòng)；CS組與WS組的大鼠體重開(kāi)始增加、大便無(wú)肉眼血便、飲食活動(dòng)正常。根據(jù)疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分，第三天時(shí)：其它各組和正常對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義(P<0.05)，模型對(duì)照組與模型生理鹽水組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，模型對(duì)照組分別與復(fù)方雙苓止瀉散組及萬(wàn)鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，模型生理鹽水組分別與復(fù)方雙苓止瀉散組及萬(wàn)鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，復(fù)方雙苓止瀉散組與萬(wàn)鑫母仔快康組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；第六天時(shí)各組之間比較結(jié)果與第三天時(shí)各組之間比較結(jié)果相同；DT組與DS組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，ST組與SS組比

7、較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，CT組與SS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，WT組與WS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2、大鼠腸管HE染色及病理?yè)p傷結(jié)果
　　正常對(duì)照組大鼠結(jié)腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，單層柱狀上皮細(xì)胞排列整齊，腺體結(jié)構(gòu)排列規(guī)則；DSS模型組和DSS生理鹽水組大鼠結(jié)腸黏膜充血、水腫、甚至缺失，腺體增生，排列紊亂，腸柱狀上皮細(xì)胞壞死脫落，細(xì)胞之間界限不清，黏膜下有大量淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞侵潤(rùn)，呈典型的炎癥改

8、變；CT組與WT組大鼠結(jié)腸黏膜充血水腫減輕，黏膜下淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞減少；CS組與WS組的大鼠，結(jié)腸黏膜受損結(jié)構(gòu)明顯恢復(fù)，腸柱狀上皮細(xì)胞排列整齊，黏膜下只有少量淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞。根據(jù)組織學(xué)損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示，第三天時(shí)：其它各組和正常對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，模型對(duì)照組與模型生理鹽水組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，模型對(duì)照組分別與復(fù)方雙苓止瀉散組及萬(wàn)鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，模型生

9、理鹽水組分別與復(fù)方雙苓止瀉散組及萬(wàn)鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，復(fù)方雙苓止瀉散組與萬(wàn)鑫母仔快康組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；第六天時(shí)各組之間比較結(jié)果與第三天時(shí)各組之間比較結(jié)果相同；DT組與DS組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，ST組與SS組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，CT組與CS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，WT組與WS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3、大鼠結(jié)腸黏膜HSP70的表達(dá)

10、
　　正常對(duì)照組中大鼠結(jié)腸黏膜HSP70表達(dá)最高，DSS模型組和DSS模型生理鹽水組大鼠腸黏膜HSP70的表達(dá)明顯低于正常對(duì)照組；CS組和WS組大鼠結(jié)腸黏膜HSP70的表達(dá)比DSS模型組明顯增強(qiáng)，但表達(dá)量仍低于正常對(duì)照組。統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示，第三天時(shí)：其它各組和正常對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，模型對(duì)照組與模型生理鹽水組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，模型對(duì)照組分別與復(fù)方雙苓止瀉散組及萬(wàn)鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

11、<0.05)，模型生理鹽水組分別與復(fù)方雙苓止瀉散組及萬(wàn)鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，復(fù)方雙苓止瀉散組與萬(wàn)鑫母仔快康組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；第六天時(shí)各組之間比較結(jié)果與第三天時(shí)各組之間比較結(jié)果相同；DT組與DS組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，ST組與SS組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，CT組與CS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，WT組與WS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：復(fù)方雙