文昌魚Bf-C2基因的克隆、表達與進化分析.pdf

1、文昌魚屬于脊索動物門頭索動物亞門，長久以來一直被認為是現(xiàn)存的與脊椎動物親緣關系最近的無脊椎動物。其形體結構、發(fā)育模式和基因組都代表了脊椎動物最簡單的模式，為研究脊椎動物免疫的起源和免疫基因的進化提供了一個最理想的實驗動物模型。雖然缺乏類似脊椎動物的適應性免疫系統(tǒng)，文昌魚仍然能夠在多種生存環(huán)境下健康生長，繁殖后代，它們的成功很大的程度上依賴于其有效的先天性免疫系統(tǒng)。補體系統(tǒng)是先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分，是一個復雜的限制性蛋白水解系統(tǒng)。補

2、體成分可以通過經典途徑、替代途徑以及凝集素途徑活化。補體B因子又稱C3激活劑前體，是補體替代激活途徑的關鍵酶之一，主要由肝臟合成。B因子及其同源基因的克隆在人、黑猩猩、鼠、非洲爪蟾、斑馬魚、七鰓鰻、海鞘、海膽、鱟、?？葎游镏卸加袌蟮溃乙延袑嶒灡砻魑牟~存在補體替代途徑，但文昌魚B因子基因的克隆及其進化分析迄今未見報道。本論文主要利用分子生物學方法，克隆得到文昌魚具有完整編碼框的B因子eDNA全長，并對B因子的表達和功能進行分析。文

3、昌魚B因子cDNA全長2362bp，開放閱讀框2259bp，編碼752個氨基酸的蛋白質(理論蛋白分子量為82.6KDa)。文昌魚B因子為嵌合蛋白，結構域組成為CCP-EGF-CA-CCP-CCP-vWFA-SP，與哺乳動物B因子結構域相比在結構域CCP1與結構域CCP2之間另外具有一個EGF CA結構域，是Bf/C2家族的一個新成員。熒光實時定量PCR結果顯示文昌魚受脂多糖(LPS)刺激后，其肝盲囊中BbBf/C2表達量迅速升高且持續(xù)維