新型鈣離子熒光探針的設(shè)計(jì)與合成.pdf

1、鈣離子是人體細(xì)胞中含量較多的二價(jià)金屬離子，在細(xì)胞內(nèi)扮演者重要的信使分子角色，而且在眾多生理過(guò)程中都有鈣離子的參與，如細(xì)胞的分裂及分化、物質(zhì)代謝等重要生理過(guò)程。因此，準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度及空間分布顯得十分重要，為研究許多疾病、生理、病理等過(guò)程奠定了基礎(chǔ)。目前，測(cè)定細(xì)胞內(nèi)鈣離子最常見(jiàn)的方法是使用小分子熒光探針，其中最具代表性的是Tisen等研究者設(shè)計(jì)的第二代(Fura-2)、第三代(Fluo-3)鈣離子熒光指示劑。但是Fura-2激發(fā)

2、波長(zhǎng)較短，處于紫外光區(qū)，紫外光激發(fā)會(huì)給細(xì)胞帶來(lái)?yè)p傷。而Fluo-3屬于熒光增強(qiáng)型探針，無(wú)法定量的指示鈣離子濃度。目前尚缺少性能優(yōu)良的鈣離子熒光指示劑，所以設(shè)計(jì)和合成新型的鈣離子熒光探針顯得尤為重要。
　　本文展開(kāi)了以下幾方面的研究：⑴以鄰硝基苯酚為起始原料，合成了鈣離子熒光指示劑的重要中間體BAPTA-CH3-CHO和BAPTA-CH3-NH2，并使用MALDI-TOF-MS、13C NMR、1H NMR對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。研究了反

3、應(yīng)條件對(duì)合成BAPTA-CH3-CHO以及BAPTA-CH3-NH2的影響，改進(jìn)了合成方法，優(yōu)化了反應(yīng)條件，提高了反應(yīng)收率。⑵以BAPTA-CH3-CHO為鈣離子熒光指示劑受體，在BAPTA-CH3-CHO受體上引入BODIPY類熒光發(fā)色團(tuán)，合成了鈣離子熒光探針BODIPY-S和BODIPY-D，并使用MALDI-TOF-MS、13C NMR、1H NMR對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。熒光光譜測(cè)試顯示BODIPY-S和BODIPY-D的最大熒光發(fā)射