創(chuàng)制抗三種以上病害番茄育種材料的研究.pdf

1、番茄是一種世界性的蔬菜，產(chǎn)量高，營(yíng)養(yǎng)豐富，口感好，可以當(dāng)作水果食用。但是番茄病害是限制番茄生產(chǎn)的一個(gè)很大因素，隨著番茄栽培面積的擴(kuò)展，番茄病蟲(chóng)害的危害越來(lái)越嚴(yán)重，對(duì)番茄擴(kuò)大化生產(chǎn)產(chǎn)生了巨大的影響。目前，培育抗多種病害的番茄品種是防治病蟲(chóng)害最有效的方法。利用傳統(tǒng)育種方法培育多抗性番茄品種需要的育種時(shí)間長(zhǎng)，工作量大，而且受環(huán)境和地域影響很大。利用分子標(biāo)記技術(shù)，結(jié)合傳統(tǒng)育種方法培育抗多種病害的番茄種質(zhì)資源，可以保證目標(biāo)性狀的準(zhǔn)確性，而且能減少

2、工作量，縮短育種年限。
　　 本試驗(yàn)通過(guò)多親雜交技術(shù)，將抗番茄葉霉病、番茄根結(jié)線蟲(chóng)病、番茄枯萎病和番茄黃化曲葉病毒病的材料進(jìn)行雜交，利用分子標(biāo)記輔助選擇和人工接種病原菌鑒定法相結(jié)合，培育同時(shí)抗多種病害且品質(zhì)優(yōu)良的番茄材料，為利用基因聚合技術(shù)選育多抗的番茄優(yōu)良品種奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)主要結(jié)果如下:
　　 1.利用多親雜交技術(shù)，獲得同時(shí)含抗番茄葉霉?。╢-5）、番茄根結(jié)線蟲(chóng)病（Mi）、番茄枯萎病(I-2)和番茄黃化曲葉病毒病（T

3、y-1、Ty-2）5種抗病基因的三交種F1代材料，對(duì)該材料進(jìn)行自交繁殖，得到了三交種F2和F3代番茄植株。
　　 2.查找大量相關(guān)文獻(xiàn)，從中選取番茄相關(guān)抗性的特異性引物，經(jīng)過(guò)計(jì)算和比較特異性引物的△G值、Tm值和CG含量，以及檢驗(yàn)單引物PCR特異性擴(kuò)增.的結(jié)果，最終得到了能夠應(yīng)用于多重PCR體系的4對(duì)特異性引物。
　　 3.本試驗(yàn)利用多重PCR技術(shù)，利用篩選的特異性引物，建立了可以同時(shí)對(duì)cf-5、Mi、Ty-1和Ty-2

4、基因進(jìn)行擴(kuò)增的多重PCR技術(shù)，并通過(guò)多次重復(fù)試驗(yàn)，證明了該技術(shù)的準(zhǔn)確性和適用性。該技術(shù)可以同時(shí)對(duì)番茄葉霉病、番茄根結(jié)線蟲(chóng)病和番茄黃化曲葉病毒病等相關(guān)基因進(jìn)行分子標(biāo)記篩選，將其與傳統(tǒng)的育種方法相結(jié)合，可以快速的選育能同時(shí)抗三種病害、品質(zhì)優(yōu)良的番茄種質(zhì)資源。
　　 4.應(yīng)用本試驗(yàn)建立的多重PCR技術(shù)，對(duì)試驗(yàn)中繁育的三交種自交后代進(jìn)行分子標(biāo)記輔助篩選，剔除偽雜株、不能抗3種或3種以上病害的、生長(zhǎng)狀態(tài)不良的番茄材料，同時(shí)人工接種病原菌對(duì)