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文檔簡(jiǎn)介
1、以番茄上危害較大的3種病原細(xì)菌:番茄細(xì)菌性潰瘍病菌Clavibacter michiganense subsp.michiganse(CMM)、番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌Pseudomonas syringae pv.tomato(PST)和番茄青枯病菌Ralstonia solanacearum(RS)為研究對(duì)象,分別以這3種細(xì)菌的基因片段作為靶標(biāo)序列,以小鼠xist基因中的兩段序列作為連接序列,根據(jù)設(shè)計(jì)原則設(shè)計(jì)鎖式探針以及通用引物,優(yōu)化并建
2、立滾環(huán)擴(kuò)增檢測(cè)體系,并與常規(guī)PCR進(jìn)行對(duì)比,比較二者的靈敏度和特異性;之后針對(duì)這3種病原細(xì)菌,建立起基于鎖式探針的反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)體系,并測(cè)試其靈敏度和特異性。
研究結(jié)果表明,根據(jù)番茄潰瘍、番茄斑點(diǎn)、番茄青枯病原菌的特異序列和鎖式探針的設(shè)計(jì)原則,設(shè)計(jì)出的3條鎖式探針,通過(guò)對(duì)其特異性和靈敏度的檢測(cè),表明設(shè)計(jì)的這3條鎖式探針特異性好,靈敏度高,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)靶標(biāo)序列的特異性檢測(cè);優(yōu)化后的滾環(huán)擴(kuò)增的體系,可以特異性地檢測(cè)出這3種病原菌,
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