三種中草藥抗HBV活性的初步評價.pdf

1、目前,全世界大約有3.5億HBV攜帶者,HBV感染后不僅會引發(fā)急、慢性肝炎,還可能導(dǎo)致肝硬化和原發(fā)性肝癌。臨床上使用的治療藥物毒副作用大、易產(chǎn)生耐藥性且價格昂貴,而中草藥具有高效低毒,多作用靶點等特點,所以從中草藥中尋找高效低毒的新型抗HBV活性成分是現(xiàn)階段研發(fā)抗HBV藥物的熱點之一。
　　本課題前期對33種中草藥進(jìn)行抗HBV活性篩選,發(fā)現(xiàn)金蕎麥、檳榔和石花3種中草藥都具有較好的抗HBV活性。
　　為了闡明金蕎麥、檳榔和石花

2、的抗HBV活性物質(zhì),本文選用HepG22.2.15細(xì)胞為體外篩選模型,以實驗藥物對HepG22.2.15細(xì)胞合成、分泌HBeAg的抑制作用為評價指標(biāo),對3種中草藥的抗HBV活性展開了初步的研究。具體研究內(nèi)容如下:
　　(1)利用HepG22.2.15細(xì)胞模型檢測金蕎麥、檳榔和石花3種藥物醇提物對HBeAg、HBsAg分泌的影響,結(jié)果表明,最大無毒濃度時3種藥物對HBeAg的抑制率分別為54.77％、52.88%和67.03%。檳榔

3、對HBsAg抑制率較低,金蕎麥和石花對HBsAg無抑制作用。
　　(2)金蕎麥和檳榔醇提物的水溶部分用AB-8大孔吸附樹脂、硅膠柱、凝膠柱等層析方法進(jìn)行分離提取。實驗結(jié)果表明,縮合單寧是金蕎麥和檳榔的主要活性組分(F1組分)。其中金蕎麥F1組分對HBeAg的抑制率為63.27%,IC50為30.09μg/mL,檳榔F1組分對HBeAg的抑制率為55.40%,IC50為38.63μg/mL。
　　(3)確定金蕎麥與檳榔活性組分

4、后,又分離篩選了石花的抗HBV活性成分。檢測發(fā)現(xiàn),石花活性物質(zhì)大部分集中于不溶于水的部位(A),其對HBeAg的抑制率為78.25%,IC50為28.59μg/mL。將水不溶部位用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分別溶解,所得組分用HepG22.2.15細(xì)胞檢測其抗HBV活性,結(jié)果顯示出氯仿部位對HBeAg的抑制效果最好,最大無毒濃度下的抑制率為64.85%,IC50為31.32μg/mL。其次為正丁醇部位,對HBeAg抑制率為50.15%,IC

5、50為65.35μg/mL。
　　(4)通過硅膠、凝膠柱層析、重結(jié)晶等分離純化方法,從石花氯仿部位得到3個化合物,根據(jù)1HNMR和13CNMR波譜數(shù)據(jù),鑒定3種化合物分別為:2,4-二羥基-6-甲?；?3-甲基苯甲酸甲酯(1),3,5-二羥基-4-甲基苯甲酸甲酯(2)和β-苔黑酚羧酸甲酯(3)。
　　(5)對分離出的3個化合物進(jìn)行了抗HBV活性評價,結(jié)果表明,化合物1和化合物3對HBeAg的抑制作用極顯著,抑制率分別為33.