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文檔簡(jiǎn)介
1、黃瓜枯萎病是由尖孢鐮刀菌黃瓜專化型Fusarium oxysporum f sp cucumerinum(Foc)引起的重要土傳病害。真菌菌絲際是一個(gè)類似根際環(huán)境的活躍微區(qū),其中棲居的微生物具有重要的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)意義。生存于病原菌菌絲際的細(xì)菌可能在病害發(fā)生過程中起著重要作用。本研究從微生物生態(tài)學(xué)角度,研究連作和非連作條件下,黃瓜枯萎病菌—枯萎病菌菌絲際細(xì)菌—枯萎病之間的關(guān)系,探討生防芽胞桿菌對(duì)菌絲際細(xì)菌的影響,為生防芽胞桿菌的應(yīng)用提供
2、指導(dǎo)。
運(yùn)用Illumina而通量測(cè)序方法對(duì)連作和病原菌引入條件下Foc菌絲際細(xì)菌非培養(yǎng)群落構(gòu)成分析表明連作或接種Foc再連作明顯影響Foc菌絲際細(xì)菌菌群構(gòu)成,使菌絲際優(yōu)勢(shì)細(xì)菌Rhizobiumsp、Achromobacter sp和Stenotrophomonas sp的豐度發(fā)生明顯變化。連作土壤中菌絲際可培養(yǎng)細(xì)菌的豐度變化與非培養(yǎng)條件下一致,而Foc引入不僅Rhizobium sp和Stenotrophomonas sp的
3、豐度發(fā)生明顯變化,Microbacterium sp和Pseudoxanthomonas sp的豐度也發(fā)生明顯變化;接種Foc后再連作還使Flavobacterium sp豐度發(fā)生變化。
對(duì)菌絲際細(xì)菌單菌株的功能研究表明,25株菌絲際細(xì)菌中有12株可抑制Foc菌絲生長(zhǎng),其中優(yōu)勢(shì)細(xì)菌Rhizobium spp和Achromobacter spp的抑制作用較強(qiáng)。溫室盆栽條件下,不同菌絲際細(xì)菌對(duì)病害發(fā)生的影響不同。所測(cè)試的15株菌絲
4、際細(xì)菌中,13株表現(xiàn)出較好的防病作用,其中Rhizobium sp對(duì)中、低致病力枯萎病菌的防效分別可達(dá)74%和622%,P putida與中、低致病力Foc混和接種時(shí),對(duì)抑制和促進(jìn)病害的發(fā)生。Massilia sp與中、低致病力Foc混和接種時(shí),病情指數(shù)分別增加31.1%和583%,Olivibacter sp與低致病力Foc混和接種時(shí),病情指數(shù)增加62.3%。根據(jù)高通量測(cè)序分析中優(yōu)勢(shì)細(xì)菌的豐度,設(shè)計(jì)不同的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌組合,并利用分離到的細(xì)
5、菌測(cè)定細(xì)菌組合的防病功能。結(jié)果表明,Rhizobium sp和Achromobacter sp組合中兩菌株豐度的變化并不明顯影響其防病效果,但Rhizobium sp、Stenotrophomonas sp和Achromobacter sp組合中各菌豐度的變化顯著影響植株的生長(zhǎng)。
顯微鏡觀察表明,菌絲際細(xì)菌Achromobacter sp、Stenotrophomonas sp、Massilia sp和Olivibacter
6、sp可在Foc菌絲上定殖并隨Foc菌絲的生長(zhǎng)而遷移。生防芽胞桿菌B006可抑制有害細(xì)菌Olivibacter sp和Massilia sp的生長(zhǎng),其菌懸液加入Foc菌絲微生境后,可以減少M(fèi)assilia sp和Olivibacter sp在Foc菌絲上的定殖量。
本研究首次對(duì)連作和病原菌引入條件下枯萎病菌菌絲際細(xì)菌的種群構(gòu)成和功能進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)連作和病原菌的引入明顯影響病原菌菌絲際細(xì)菌群落構(gòu)成和功能。菌絲際細(xì)菌優(yōu)勢(shì)細(xì)菌比例的
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