連作和芽胞桿菌對黃瓜枯萎病菌菌絲際細(xì)菌的影響.pdf

1、黃瓜枯萎病是由尖孢鐮刀菌黃瓜?；虵usarium oxysporum f sp cucumerinum（Foc）引起的重要土傳病害。真菌菌絲際是一個類似根際環(huán)境的活躍微區(qū)，其中棲居的微生物具有重要的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)意義。生存于病原菌菌絲際的細(xì)菌可能在病害發(fā)生過程中起著重要作用。本研究從微生物生態(tài)學(xué)角度，研究連作和非連作條件下，黃瓜枯萎病菌—枯萎病菌菌絲際細(xì)菌—枯萎病之間的關(guān)系，探討生防芽胞桿菌對菌絲際細(xì)菌的影響，為生防芽胞桿菌的應(yīng)用提供

2、指導(dǎo)。
　　運用Illumina而通量測序方法對連作和病原菌引入條件下Foc菌絲際細(xì)菌非培養(yǎng)群落構(gòu)成分析表明連作或接種Foc再連作明顯影響Foc菌絲際細(xì)菌菌群構(gòu)成，使菌絲際優(yōu)勢細(xì)菌Rhizobiumsp、Achromobacter sp和Stenotrophomonas sp的豐度發(fā)生明顯變化。連作土壤中菌絲際可培養(yǎng)細(xì)菌的豐度變化與非培養(yǎng)條件下一致，而Foc引入不僅Rhizobium sp和Stenotrophomonas sp的

3、豐度發(fā)生明顯變化，Microbacterium sp和Pseudoxanthomonas sp的豐度也發(fā)生明顯變化;接種Foc后再連作還使Flavobacterium sp豐度發(fā)生變化。
　　對菌絲際細(xì)菌單菌株的功能研究表明，25株菌絲際細(xì)菌中有12株可抑制Foc菌絲生長，其中優(yōu)勢細(xì)菌Rhizobium spp和Achromobacter spp的抑制作用較強(qiáng)。溫室盆栽條件下，不同菌絲際細(xì)菌對病害發(fā)生的影響不同。所測試的15株菌絲

4、際細(xì)菌中，13株表現(xiàn)出較好的防病作用，其中Rhizobium sp對中、低致病力枯萎病菌的防效分別可達(dá)74％和622％，P putida與中、低致病力Foc混和接種時，對抑制和促進(jìn)病害的發(fā)生。Massilia sp與中、低致病力Foc混和接種時，病情指數(shù)分別增加31.1％和583％，Olivibacter sp與低致病力Foc混和接種時，病情指數(shù)增加62.3％。根據(jù)高通量測序分析中優(yōu)勢細(xì)菌的豐度，設(shè)計不同的優(yōu)勢細(xì)菌組合，并利用分離到的細(xì)

5、菌測定細(xì)菌組合的防病功能。結(jié)果表明，Rhizobium sp和Achromobacter sp組合中兩菌株豐度的變化并不明顯影響其防病效果，但Rhizobium sp、Stenotrophomonas sp和Achromobacter sp組合中各菌豐度的變化顯著影響植株的生長。
　　顯微鏡觀察表明，菌絲際細(xì)菌Achromobacter sp、Stenotrophomonas sp、Massilia sp和Olivibacter

6、sp可在Foc菌絲上定殖并隨Foc菌絲的生長而遷移。生防芽胞桿菌B006可抑制有害細(xì)菌Olivibacter sp和Massilia sp的生長，其菌懸液加入Foc菌絲微生境后，可以減少Massilia sp和Olivibacter sp在Foc菌絲上的定殖量。
　　本研究首次對連作和病原菌引入條件下枯萎病菌菌絲際細(xì)菌的種群構(gòu)成和功能進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)連作和病原菌的引入明顯影響病原菌菌絲際細(xì)菌群落構(gòu)成和功能。菌絲際細(xì)菌優(yōu)勢細(xì)菌比例的