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1、該研究首先采用含bFGF的無血清懸浮培養(yǎng)方法,獲得具有自我更新和多分化潛能等干細(xì)胞樣特性的新生大鼠中腦神經(jīng)前體細(xì)胞.在此基礎(chǔ)上,較為系統(tǒng)地研究了極低頻電磁場對新生大鼠中腦神經(jīng)前體細(xì)胞分化的作用及其可能的機(jī)制.該研究的主要結(jié)果如下:1.與自然分化的對照組相比,細(xì)胞因子IL-1α(50pg/ml)明顯增加中腦神經(jīng)前體細(xì)胞衍生的神經(jīng)元數(shù)目;CNTF(10ng/ml)、GDNF(100ng/ml)與天麻素(10<'-5>mM)抑制效應(yīng);葛根素(
2、10<'-5>mM)、牛蒡子甙(10<'-5>mM)、人參造甙Rg1(10<'-5>mM)等外種中藥單體及17β—雌二醇(分別10<'-5>mM、10<'-7>mM和10<'-9>mM)對此沒有影響.提示IL-1α是上述化學(xué)物質(zhì)中唯一的可用于體外預(yù)處理移植前的中腦神經(jīng)前體細(xì)胞,有望增加植入后神經(jīng)元數(shù)量的細(xì)胞因子.2.CNTF和IL-1α對中腦神經(jīng)前體細(xì)胞神經(jīng)元向分化的效應(yīng)與濃度有關(guān);CNTF 0.1ng/ml和IL-1α50pg/ml組
3、神經(jīng)元向分化百分比明顯高于自然分化組;CNTF 10ng/ml組該比例明顯低于自然分化組,IL-1α100pg/ml組無明顯變化.3.施加ELF-EMF(5Hz/8mT)后,小劑量CNTF的促進(jìn)效應(yīng)增強(qiáng),特別是EMF還可使大劑量CNTF抑制神經(jīng)元向分化的效應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)榇龠M(jìn)神經(jīng)元向分化;EMF可抑制小劑量IL-1α促進(jìn)神經(jīng)元分化的作用,但不影響大劑量IL-1α的誘導(dǎo)結(jié)果.4.中腦神經(jīng)前體細(xì)胞分別5/10/30/40Hz(8mT)及5Hz(4m
4、T)EMF不同時(shí)程的體外處理后,其神經(jīng)元生成數(shù)量均增加,以20Hz/8mT EMF效應(yīng)最大;ELF-EMFs在此效應(yīng)具有頻率特異性,場強(qiáng)也是影響因素;10/20/40 Hz(8mT)EMFs還可增加衍生于中腦神經(jīng)前體細(xì)胞的TH陽性細(xì)胞數(shù);但各頻率EMF對神經(jīng)突的延伸均無作用.5.增殖及分化期的新生大鼠中腦神經(jīng)前體細(xì)胞neuroD、mash1和notch1基因表達(dá)的測定結(jié)果表明,neuroD基因在新生大鼠中腦神經(jīng)前體細(xì)胞神經(jīng)元向分化中發(fā)揮
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