培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和pH值對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響.pdf

1、目的：研究不同培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和pH值對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響，探索較為優(yōu)化的體外受精培養(yǎng)箱內(nèi)溫度及pH值，為人類輔助生殖技術(shù)提供較規(guī)范的實驗方法與數(shù)據(jù)。
　　方法：采用小鼠卵母細(xì)胞與精子進行體外受精，并將受精后的胚胎置于胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)，分別將培養(yǎng)箱溫度設(shè)在36.4℃、36.7℃、37.0℃、37.3℃、37.6℃，觀察、計數(shù)D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率，應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡檢測胚胎染色體的畸

2、變類型及計算畸變率。分別將培養(yǎng)液pH值設(shè)在7.05、7.20、7.35、7.50、7.65，觀察、計數(shù)D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率，應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡觀察胚胎紡錘體的改變情況。
　　結(jié)果：1培養(yǎng)箱內(nèi)溫度在小鼠配子體外受精及胚胎發(fā)育影響方面，受精率在37.0℃時最高，36.4與37.0℃組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），36.4與37.3℃組比較（P＞0.005），無統(tǒng)計學(xué)差異，36.4與37

3、.6℃組比較（P＜0.005），有統(tǒng)計學(xué)差異，說明在36.4-37.3℃之間較適合配子受精。卵裂率在36.7℃時最高，36.4與37.0℃組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），36.4與37.3℃組比較（P＞0.005），無統(tǒng)計學(xué)差異，36.4與37.6℃組比較（P＜0.005），有統(tǒng)計學(xué)差異，說明在36.4-37.3℃之間時較適合受精卵卵裂。囊胚形成率在37.0℃時最高，36.4與37℃組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005），36.7與

4、37.0℃組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），36.7與37.3℃組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），說明在36.7-37.0℃之間較適合囊胚形成。囊胚孵出率在37.0℃時最高，36.4與37.0℃組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005），36.7與37.0℃組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），36.7與37.3℃組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），說明在36.7-37.0℃之間較適合囊胚孵出。
　　2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)液pH值在小

5、鼠體外受精及胚胎發(fā)育影響方面，配子受精率在pH7.50最高，pH7.05與7.20組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005），pH7.20與7.65組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），說明在7.20-7.65之間較適合配子受精。卵裂率在pH7.35最高，pH7.05與7.20組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005），pH7.20與7.50組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），pH7.5與7.65組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005），說明在7.2

6、0-7.50之間較適合受精卵卵裂。囊胚形成率在pH7.50最高， pH7.05與7.20組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005），pH7.20與7.50組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005），pH7.50與7.65組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005），說明在7.20-7.50之間較適合囊胚形成。囊胚孵出率在pH7.35最高，pH7.05與7.20組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.005）， pH7.20與7.50組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005）