根結(jié)線蟲誘導(dǎo)的巨型細(xì)胞研究.pdf

1、隨機(jī)捕獲在巨型細(xì)胞誘導(dǎo)形成中的關(guān)鍵啟動(dòng)子，通過隨機(jī)插入無啟動(dòng)子的GUS報(bào)告基因到煙草基因組中，然后在大量的轉(zhuǎn)基因煙草中篩選和捕獲在根結(jié)部位有強(qiáng)啟動(dòng)，而在煙草的其它部位沒有或很少啟動(dòng)的啟動(dòng)子，結(jié)果表明在根結(jié)線蟲誘導(dǎo)的根結(jié)部位有特異性的啟動(dòng)子上調(diào)。比較四種分離方法，實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)巨型細(xì)胞的成功分離與觀察，并證明所分離的細(xì)胞為根結(jié)線蟲誘導(dǎo)形成的巨型細(xì)胞，為今后直接在單個(gè)細(xì)胞水平上分析巨型細(xì)胞的發(fā)育、營養(yǎng)運(yùn)輸和功能等相關(guān)研究提供了一種方法。在控制實(shí)

2、驗(yàn)條件下，運(yùn)用組織化學(xué)方法對(duì)巨型細(xì)胞中的糖類、蛋白質(zhì)、核酸和鈣鹽等進(jìn)行石蠟切片觀察。切片觀察結(jié)果表明，巨型細(xì)胞內(nèi)的有豐富的糖類物質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸、鈣離子，由此從組織學(xué)水平證實(shí)根結(jié)線蟲侵染誘導(dǎo)巨型細(xì)胞的形成是在細(xì)胞水平上線蟲對(duì)正常細(xì)胞的一個(gè)調(diào)控過程，其中涉及到了對(duì)細(xì)胞內(nèi)多個(gè)基因的啟動(dòng)過程。這種誘導(dǎo)物質(zhì)有可能是由根結(jié)線蟲的口針直接注入食道腺分泌物質(zhì)的方式來完成對(duì)巨型細(xì)胞的誘導(dǎo)。通過組織病理學(xué)研究手段，觀察營養(yǎng)脅迫條件下，根結(jié)線蟲感染誘導(dǎo)形成