人工老化水稻種子生理生化變化、DNA損傷及活力恢復(fù)的研究.pdf

1、本文以浙江省主栽品種浙優(yōu)12和Ⅱ優(yōu)7954為試驗(yàn)材料，采用高溫高濕(43℃、100％RH)人工加速老化3、6、9天得到不同活力的水稻種子，模擬水稻種子劣變過(guò)程，對(duì)其生理生化和超微結(jié)構(gòu)變化和干種子DNA損傷進(jìn)行ISSR標(biāo)記分析并探索了水稻老化種子活力恢復(fù)的方法，從而為水稻種子貯藏和生產(chǎn)實(shí)踐上活力的保持提供實(shí)際參考和理論依據(jù)。取得了如下結(jié)果:
　　 1.隨著老化程度加深，Ⅱ優(yōu)7954和浙優(yōu)12種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)

2、逐漸降低，平均發(fā)芽時(shí)間逐漸延長(zhǎng)。老化6天后，種子的活力下降變快，且與未老化種子有顯著差異。除浙優(yōu)12種子的發(fā)芽率外，兩個(gè)品種老化6天后種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)均顯著低于未老化種子，平均發(fā)芽時(shí)間則顯著增加。老化9天后種子的發(fā)芽指標(biāo)最低。同時(shí)，隨老化程度加深，種子的呼吸作用減弱，具體表現(xiàn)為萌發(fā)啟動(dòng)時(shí)間(IMT)和理論萌發(fā)時(shí)間(RGT)延長(zhǎng)，萌發(fā)氧氣消耗速率(OMR)降低。老化后種子的電導(dǎo)率、浸出液核苷酸含量和MDA含量與種子

3、的活力呈顯著負(fù)相關(guān)，且隨老化程度加深而明顯增加，老化對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)的損傷較大。隨種子老化時(shí)間延長(zhǎng)，過(guò)氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性逐漸下降。此外，老化后水稻種子的超微結(jié)構(gòu)受損，主要表現(xiàn)為線粒體膨脹、膜破損及解體，脂肪體融合成大的脂肪團(tuán)。
　　 2.Ⅱ優(yōu)7954的POD、浙優(yōu)12不同活力的種子萌發(fā)后幼苗POD、SOD、CAT、APX指標(biāo)與對(duì)照比無(wú)顯著差異，表明老化種子長(zhǎng)成的幼苗保護(hù)酶活性得到一

4、定程度的恢復(fù);且不同品種之間存在一定的差異。隨著水稻種子老化時(shí)間延長(zhǎng)，幼苗的整齊度降低，長(zhǎng)勢(shì)不均勻，老化9天出現(xiàn)大量短小幼苗。
　　 3.采用CTAB法直接從人工老化水稻干種子中提取DNA,進(jìn)行ISSR標(biāo)記分析。引物UBC886擴(kuò)增譜帶發(fā)現(xiàn)老化后Ⅱ優(yōu)7954和浙優(yōu)12與對(duì)照比在600-700bp條帶數(shù)減少，UBC811擴(kuò)增譜帶發(fā)現(xiàn)老化9天的兩個(gè)品種擴(kuò)增譜帶與對(duì)照比在350-400bp條帶明顯缺失。隨著種子老化程度加深，DNA條帶