中國(guó)橫斷山地區(qū)綿腹衣屬地衣分類(lèi)及分子鑒別研究.pdf

1、地衣是由共生菌(Mycobiont)和共生藻(Photobiont)互惠共生形成的一類(lèi)生物有機(jī)體。綿腹衣屬(AnziaStizenb.)隸屬于梅衣科(Parmeliaceae)，子囊地衣(Ascomycota)，地衣型真菌(LichenizeAFungi)；具有地衣體葉狀，下表面無(wú)皮層，而為綿腹組織層；子囊盤(pán)位于地衣體上表面；單個(gè)子囊內(nèi)孢子眾多；孢子無(wú)色，單胞，月牙型的特征；主要分布在亞熱帶、寒溫帶，大部分附生于樹(shù)皮上。全世界己知有37

2、個(gè)種；其中，亞洲19個(gè)種；中國(guó)已報(bào)道5個(gè)種，有3個(gè)種為民間藥用地衣，目前尚無(wú)對(duì)中國(guó)橫斷山地區(qū)綿腹衣屬地衣的分類(lèi)研究。本研究采用地衣經(jīng)典分類(lèi)、DNA條形碼研究方法，明確橫斷山地區(qū)綿腹衣屬地衣物種狀況，提供資源及地理分布的本底數(shù)據(jù)，并篩選出適合作為綿腹衣屬地衣鑒別的nrDNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄區(qū)(ITS)基因片段。另外，對(duì)中國(guó)橫斷山地區(qū)同屬于梅衣科的小孢發(fā)屬進(jìn)行分子系統(tǒng)研究，為今后樹(shù)發(fā)群地衣的分子相關(guān)研究提供借鑒。
　　 1.中國(guó)橫斷山地區(qū)綿腹

3、衣屬Anzia的經(jīng)典分類(lèi)研究
　　 對(duì)中科院昆明植物研究所標(biāo)本館的475份綿腹衣屬地衣標(biāo)本分類(lèi)研究，明確橫斷山地區(qū)綿腹衣屬有12個(gè)種，分別為A.colpotaVain.，A.formosanaY.Asahina，A.hypoleucoidesMüll.Arg.，A.japonica(Tuck.)Müll.Arg.，A.leucobatoides(Nyl.)Zahlbr.，A.leucobatoidesf.hypomelaenaA

4、.Zahlbruckner，A.opuntiellaMüll.Arg.A。ornate(Zahlbr.)Asahina，A.ornatoidesYoshimura，A.rhabdorhizaLiS.Wang&M。M.Liangsp.nov.，A.sp.Ⅰ和A.sp.Ⅱ；其中，A.rhabdorhiza，A.sp.Ⅰ和A.sp.Ⅱ?yàn)?個(gè)新種；認(rèn)為原記載的A.physoideaA.L.Smith.的所有標(biāo)本，實(shí)際應(yīng)為新種A.rhabdorh

5、iza：中國(guó)橫斷山地區(qū)物種數(shù)占全世界綿腹衣屬地衣32.43％，占全亞洲63.16％。中國(guó)橫斷山地區(qū)不僅種類(lèi)較多，在滇西北的麗江地區(qū)，儲(chǔ)存量較大，推斷中國(guó)橫斷山地區(qū)為亞洲地區(qū)綿腹衣屬地衣的一個(gè)分布中心。
　　 2.中國(guó)橫斷山地區(qū)綿腹衣屬的DNA條形碼研究
　　 采用地衣核心條形碼標(biāo)記片段nrDNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)ITS1F-2KL，和ITS1LM-4兩對(duì)基因片段，以及一個(gè)補(bǔ)充條形碼葉綠體基因psbF-R片段，對(duì)中國(guó)橫

6、斷山地區(qū)綿腹衣屬地衣137份分子材料進(jìn)行研究，并從PCR擴(kuò)增及測(cè)序成功率，序列變異位點(diǎn)統(tǒng)計(jì)，序列遺傳距離差異統(tǒng)計(jì)，條形碼的“BarcodingGap”檢驗(yàn)，利用Kimura-2-parameter模型構(gòu)建的條碼鄰接樹(shù)等方面，評(píng)估所選基因片段，認(rèn)為核核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)ITS片段可以作為綿腹衣屬地衣進(jìn)行分子鑒別的候選DNA條形碼；而對(duì)于鑒別綿腹衣屬的葉綠體基因有效條碼，還有待于進(jìn)一步篩選。分子鑒別從一定程度支持經(jīng)典分類(lèi)學(xué)研究結(jié)果，認(rèn)為

7、A.colpota，Afomosana，A.hypoleucoides，A.leucobatoides，A.rhabdorhiza，A.spⅠ和A.spⅡ7個(gè)種的分類(lèi)處理可行。
　　 3.中國(guó)橫斷山地區(qū)小孢發(fā)屬I(mǎi)TS片段的分子研究
　　 分析ITS1F-4基因片段擴(kuò)增的小孢發(fā)屬50份樣品序列，使用貝葉斯推論(Bayesianinference，BI)進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建，并選取樹(shù)發(fā)群地衣中的Alectoriaochrol