家蠅蛆粉替代魚粉在凡納濱對蝦飼料中的應(yīng)用.pdf

1、本論文研究了凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)幼蝦對家蠅蛆粉(houseflymaggot meal)的表觀消化率和飼料中不同比例家蠅蛆粉對凡納濱對蝦生長性能、抗氧化和免疫指標(biāo)以及肌肉品質(zhì)、消化酶活性、肝胰腺功能的影響。并運用分子生物學(xué)技術(shù)，研究了家蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦肝胰腺蛋白質(zhì)代謝相關(guān)基因表達量的影響。具體研究內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　 1.凡納濱對蝦對家蠅蛆粉的表觀消化率。以氧化釔(Y2O3)為指示劑

2、，按照“70%基礎(chǔ)飼料+30%試驗原料”的方法測定了初始體重(2.20±0.15)g凡納濱對蝦對家蠅蛆粉的表觀消化率。結(jié)果顯示，凡納濱對蝦幼蝦對家蠅蛆粉干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和能量的表觀消化率分別為68.18%、83.34%、89.26%和75.38%。凡納濱對蝦對家蠅蛆粉總氨基酸的消化率為86.56%，氨基酸消化率的變化范圍為80.74%～92.31%，其中組氨酸、精氨酸、異亮氨酸和脯氨酸的消化率均在90%以上。本研究結(jié)果為評價家蠅蛆

3、粉的營養(yǎng)價值及其在凡納濱對蝦飼料中的應(yīng)用提供了參考依據(jù)。
　　 2.家蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦生長、抗氧化和免疫指標(biāo)的影響。選用960尾體重為(0.56±0.03)g的凡納濱對蝦隨機分為6組，分別投喂用家蠅蛆粉替代魚粉的6種飼料，替代比例(等蛋白替代)分別為0、20%、40%、60%、80%和100%，記為G0、G20、G40、G60、G80和G100，養(yǎng)殖時間為45 d。結(jié)果顯示，G20～G60組凡納濱對蝦的增重率(WGR)

4、與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，G80、G100組WGR顯著降低(P<0.05)。除G40組外，各替代組凡納濱對蝦的特定生長率(SGR)均顯著低于對照組(P<0.05)。G100組攝食量(FI)顯著低于其它各組(P<0.05)。當(dāng)替代水平不超過60%時，家蠅蛆粉對凡納濱對蝦的飼料系數(shù)(FCR)、蛋白質(zhì)效率(PER)、蛋白質(zhì)沉積率(PDR)和肝胰指數(shù)(HSI)影響不顯著(P>0.05)；隨替代水平的繼續(xù)增加，F(xiàn)CR和HSI顯著升高

5、，PER和PDR顯著降低(P<0.05)。替代組對蝦肥滿度(CF)和存活率(SR)均不同程度的高于對照組，但差異不顯著(P>0.05)。隨家蠅蛆粉替代水平的增加，全蝦粗蛋白、鈣(Ca)和總磷(P)含量顯著升高(P<0.05)，粗脂肪含量顯著降低(P<0.05)，干物質(zhì)和灰分含量差異不顯著(P>0.05)。各替代組對蝦血清和肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)含量與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，G80和G100

6、組肝胰腺MDA含量顯著高于對照組(P<0.05)。血清酚氧化酶(PO)活性隨家蠅蛆粉替代量的增加而顯著降低，其中G20組顯著高于其它各組(P<0.05)。肝胰腺堿性磷酸酶(AKP)活性隨添加量的增加而顯著降低(P<0.05)。家蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦的血細胞總數(shù)(THC)、血清一氧化氮(NO)含量、AKP活性和肝胰腺PO活性、NO含量影響不顯著(P>0.05)。在本試驗條件下，綜合考慮凡納濱對蝦的生長性能、抗氧化和非特異性免疫等指標(biāo)

7、，家蠅蛆粉可替代40%魚粉，其最大替代量不宜超過60%。
　　 3.家蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦肌肉營養(yǎng)成分、氨基酸和肌苷酸含量的影響。在上述替代試驗養(yǎng)殖結(jié)束時，制備各組肌肉樣品，測定肌肉水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量，分析肌肉游離氨基酸、結(jié)合氨基酸以及肌苷酸含量。結(jié)果顯示，對蝦肌肉粗蛋白和灰分含量隨家蠅蛆粉替代水平的增加而升高，其中G100組粗蛋白含量和G80～G100組灰分含量顯著高于對照組(P<0.05)；水分和粗脂肪含量

8、在各組之間差異不顯著(P>0.05)。各組肌肉游離氨基酸中谷氨酸、丙氨酸等鮮味氨基酸和游離鮮味氨基酸總量之間無顯著性差異(P>0.05)；除G40組外，G20-G100組游離必需氨基酸總量顯著高于對照組(P<0.05)；與對照組相比，替代組游離精氨酸含量顯著增加(P<0.05)，游離賴氨酸含量隨替代水平的增加而顯著降低(P<0.05)；G20組游離氨基酸總量顯著高于對照組(P<0.05)，其它各組之間差異不顯著(P>0.05)。替代組肌

9、肉結(jié)合氨基酸中天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和丙氨酸等鮮味氨基酸、必需氨基酸和氨基酸總量與對照組相比差異均不顯著(P>0.05)。G20-G80組肌肉肌苷酸含量與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，G100組顯著升高(P<0.05)。結(jié)果表明，當(dāng)家蠅蛆粉替代魚粉水平不超過60%時，除凡納濱對蝦肌肉游離精氨酸含量顯著升高外，對肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分組成和必需氨基酸、鮮味氨基酸和肌苷酸含量無顯著性影響。
　　 4.家蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦

10、消化酶活性、肝胰腺組織結(jié)構(gòu)和轉(zhuǎn)氨酶活性的影響。在上述替代試驗養(yǎng)殖結(jié)束后，測定各組對蝦肝胰腺、胃和腸道蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，分析肝胰腺的組織結(jié)構(gòu)和轉(zhuǎn)氨酶活性。結(jié)果顯示，家蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦肝胰腺、胃和腸道的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性均無顯著性影響(P>0.05)；家蠅蛆粉對凡納濱對蝦肝胰腺的組織結(jié)構(gòu)有不同程度的損傷，G20和G40組凡納濱對蝦肝胰腺肝小體排列整齊，基底膜完整，管腔呈星形，與對照組相比上皮細胞空泡化增多，上皮細

11、胞中出現(xiàn)未知物質(zhì)：G60組肝小體上皮細胞中未知物質(zhì)的量有所增加；當(dāng)替代水平高于80%時，肝小體中未知物質(zhì)含量明顯增加，肝小體的星形管腔部分喪失，G100組凡納濱對蝦肝小體萎縮，部分含有未知物質(zhì)的上皮細胞破裂；替代組凡納濱對蝦肝胰腺谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性均不同程度降低，與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，血清ALT、AST活性則呈現(xiàn)出顯著降低的趨勢(P<0.05)。結(jié)果表明，蠅蛆粉替代魚粉不會顯著降低凡納濱對蝦

12、肝胰腺、胃和腸道的消化酶活性，但過高替代會對肝胰腺的組織結(jié)構(gòu)造成損傷，建議蠅蛆粉的替代水平不宜超過60%。
　　 5.家蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦肝胰腺組織蛋白酶B和核糖體蛋白L8基因表達量的影響。在上述替代試驗養(yǎng)殖結(jié)束后，制備肝胰腺樣品，分析各組肝胰腺組織蛋白酶B和核糖體蛋白L8基因表達量。結(jié)果顯示，蠅蛆粉替代魚粉對凡納濱對蝦肝胰腺組織蛋白酶B(CAT B)的表達量有顯著性影響(P<0.05)，替代組CAT B的表達量均高于對