桑天牛、云斑白條天牛、星天牛雄性附腺內(nèi)容物研究.pdf

1、桑天牛、云斑白條天牛、星天牛均屬鞘翅目天牛科溝脛天牛亞科，為我國常見的林業(yè)害蟲。天牛整個幼蟲期都在樹干內(nèi)蛀食，羽化出孔后成蟲在補充營養(yǎng)階段啃食枝皮。雄性附腺是雄性生殖系統(tǒng)的重要器官，其內(nèi)容物具有激活、營養(yǎng)及促進精子貯存的作用，還能促進卵巢發(fā)育，刺激雌蟲產(chǎn)卵和調(diào)節(jié)性行為等交配效應。研究雄性附腺內(nèi)容物成分，并在此基礎(chǔ)上進一步研究內(nèi)容物生理功能，可探索通過控制生殖防治天牛的新途徑。 本研究以桑天牛、云斑天牛、星天牛雄性附腺為對象，包括

2、三方面研究內(nèi)容：(1)桑天牛、云斑白條天牛、星天牛三種天牛雄性內(nèi)生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)比較；(2)雄性附腺內(nèi)容物主要組成成分分析；(3)雄性附腺內(nèi)容物各成分的生理功能。主要結(jié)果如下： 1、桑天牛、云斑白條天牛、星天牛雄性內(nèi)生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)大體相同，均由精巢(睪丸)、輸精管、貯精囊、射精管、附腺等器官組成，左右對稱。但在精巢數(shù)目和雄性附腺著生部位存在種間差異。云斑白條天牛和桑天牛每側(cè)有2個大小相等的“葉”狀精巢，星天牛每側(cè)含有12個“小葉”狀精

3、巢。云斑白條天牛、星天牛雄性附腺與貯精囊共同匯入射精管，而桑天牛雄性附腺開口于貯精囊中部。 2、三種天牛雄性附腺內(nèi)容物中均含有可溶性蛋白、總糖等組分，且大、小附腺管內(nèi)各組分含量不同。比較三種天牛雄性附腺內(nèi)容物中蛋白和總糖含量，桑天牛附腺內(nèi)兩種物質(zhì)含量最高，星天牛次之，云斑白條天牛最低。桑天牛雄性附腺內(nèi)容物各主要組分含量依次為：可溶性蛋白>總糖>海藻糖>游離氨基酸。交配后，桑天牛雄性附腺內(nèi)四類組分含量均下降，之后可恢復到交配前水平

4、，但不同組分含量恢復時間有差異，蛋白組分在交配48h后即可恢復到交配前水平。 3、三種天牛雄性附腺蛋白經(jīng)PAGE電泳及糖蛋白染色后，蛋白譜帶具有種間差異。桑天牛大附腺管內(nèi)蛋白共分離出4組蛋白質(zhì)區(qū)帶，包括一組大分子量糖蛋白，小附腺管內(nèi)蛋白僅分離出1組大分子量糖蛋白質(zhì)區(qū)帶；經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測后附腺蛋白同樣分為4組區(qū)帶。電泳檢測同樣證明交配后48h，桑天牛雄性附腺內(nèi)蛋白組分即可恢復。 4、用不同提取方法從桑天牛雄性附腺

5、內(nèi)容物中分離得到蛋白、糖、氨基酸粗提物。將三種粗提物及總內(nèi)容物分別注入雌蟲腹部，測定各組分的生理功能。結(jié)果表明：總內(nèi)容物縮短雌蟲壽命，糖粗體物刺激雌蟲取食并延長雌蟲壽命。 5、桑天牛精子在精巢中聚集成精子束，但在貯精囊內(nèi)游離為單個精子。精子形態(tài)細長，長79.2～94.1um，寬<3.3um，頭長11.6～17.2um。選用Grace’s昆蟲培養(yǎng)液和M199培養(yǎng)液體外培養(yǎng)精子，均能使精子存活到6h。將雄性附腺總內(nèi)容物與精子共培養(yǎng)后