脂質輔助的聚合物納米顆粒表面化學特性對核酸藥物遞送的影響.pdf

1、在過去的幾年中，由于基因療法在癌癥、炎癥和其他疾病中的廣泛應用，一度認為基因療法的“黃金時代”已經(jīng)到來。臨床上涌現(xiàn)出大量具有治療效果的治療方案。隨著納米技術的蓬勃發(fā)展，人們越來越重視基于材料的基因遞送納米載體。然而，基因治療的成功受到轉運障礙的影響，目前還沒有關于基因遞送載體的表面化學特性在生物學性能中影響的全面研究。在本論文中，我們重點研究了脂質輔助的聚合物納米顆粒表面脂質結構對核酸藥物遞送的影響。
　　主要內容和結論分為兩部分

2、:
　　1.已成功設計并使用納米顆粒藥物遞送載體以口服方式遞送小干擾RNA(siRNA)用于治療炎性病癥。在本研究工作中，我們利用表面具有胺基團的合成脂質制備脂質相關的聚（乙二醇）-聚（乳酸-乙醇酸共聚物）(PEG5K-b-PLGA10K)納米顆粒(NPs)。納米載體是通過雙重乳液法制備，并且它們的表面電荷可以通過琥珀?；磻芎玫目刂坪驼{節(jié)，以產(chǎn)生具有不同表面電荷的納米顆粒，同時保持它們的尺寸和組成。根據(jù)它們的表面電荷將制備的N

3、P稱為胺化（ANP）、普通(PNP)或羧化(CNP)納米顆粒。所有NP均表現(xiàn)出期望的結構穩(wěn)定性和siRNA完整性。ANPs能夠影響RAW264.7細胞攝取和沉默效率。體內研究顯示ANP在發(fā)炎的結腸組織中有顯著的積聚量，并降低TNF-α分泌和mRNA表達水平，同時在急性潰瘍性結腸炎(UC)的小鼠模型中維持結腸組織正常。這項工作描述了一種方法來修飾包封siRNA聚合物納米粒子的表面電荷，并闡述表面電荷對用于局部炎性疾病口服遞送siRNA的影

4、響。
　　2.基于脂質的納米載體是非病毒基因遞送的主要策略之一。脂質的摻入并未影響納米載體有效的封裝，細胞質遞送和內體逃逸。然而，它們表現(xiàn)出較低的轉染效率、毒性和不穩(wěn)定性。在這項工作中，我們制備脂質庫用于合成脂質輔助納米粒子。該脂質庫包括兩類脂質，即膽固醇和烷基鏈基脂質。論文合成了具有不同鏈接基團（酰胺，酯）和陽離子頭基（脂肪族，芳香族）的基于膽固醇的脂質并進行了表征（1H NMR和ESI-MS）。論文還制備了微流控裝置以實施納米