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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 1.探討明膠底物膜法測(cè)試精子頂體酶活性的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制。 2.探討精子頂體形態(tài)和精子頂體酶之間的關(guān)系,了解不同頂體畸形精子與頂體酶活性的相關(guān)性,以及與體外受精(in vitro fertilization,IVF)受精率的關(guān)系。 3.透射電鏡檢查了解精子形態(tài)和功能之間的聯(lián)系。 4.通過對(duì)精子形態(tài)和功能檢查,選擇合適的受孕方式。 方法: 根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)標(biāo)準(zhǔn),標(biāo)本的采集是
2、在禁欲3-7天后,在本中心取精室通過手淫的方法,取精液于塑料容器中,采集后立即在37℃水域箱中靜止液化,進(jìn)行精液常規(guī)檢查,達(dá)到IVF助孕標(biāo)準(zhǔn)的精液納入標(biāo)本選擇范圍,根據(jù)形態(tài)學(xué)檢查,分為兩組(IVF和haIf-ICSI(haIf intmcytoplasmic sprminjection)組)比較。液化后的精子通過上游法處理,以備行精子改良巴氏染色檢查、明膠法測(cè)試頂體酶活性。透射電鏡檢查對(duì)11例精液標(biāo)本分析。 結(jié)果: 1
3、.明膠的鋪片溫度,合適的精子密度以及膠片的存儲(chǔ)使明膠底物膜法測(cè)定頂體酶活性的穩(wěn)定性,可靠性提高。 2.上游法處理后的精子能夠達(dá)到98.7%的成活率,為精子形態(tài)和功能的檢查奠定了活細(xì)胞的基礎(chǔ)。 3.精子正常形態(tài)率<5%的患者行IVF助孕時(shí)較精子正常形態(tài)≥5%的患者受精率降低,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 4.精子頂體形狀不規(guī)則或含有多個(gè)小空泡受精率明顯降低。頂體中含有多個(gè)小空泡頂體酶活性明顯下降。 5.精子形態(tài)學(xué)檢
4、查中,頂體形態(tài)不規(guī)則的比例在正常受精和受精障礙的比較中有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)6.透射電鏡對(duì)光鏡下不同畸形精子的結(jié)構(gòu)和功能分析。 結(jié)論: 1.上游法篩選后的精子行精子功能檢測(cè),更能反應(yīng)精子的受精情況。 2.通過質(zhì)控,明膠法測(cè)試精子頂體酶活性能夠成為一個(gè)穩(wěn)定的,較為可靠的測(cè)定精子功能的方法。 3.光學(xué)顯微鏡下頂體內(nèi)空泡是透射電鏡下核內(nèi)空泡的影像,密集核內(nèi)空泡反應(yīng)精子的成熟程度。 4.通過精
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