恒山黃芪道地藥材質(zhì)量標準研究.pdf

1、選題依據(jù):黃芪具有補氣固表、利水消腫、斂瘡生肌、托毒排膿等功效，是最常用的大宗中藥材之一，有“十藥八芪”之說?，F(xiàn)代研究表明，黃芪具有提高免疫力、抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖、利尿等多種藥理作用。恒山黃芪因主產(chǎn)于北岳恒山山脈而得名，來源于豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge)Hsiao.的干燥根，生長方式為野生或者仿野生方式，采收年限規(guī)定在四

2、年以上，主產(chǎn)于恒山及其周邊地區(qū)，因其特殊的自然環(huán)境和地質(zhì)條件適宜黃芪的生長，使得恒山黃芪具有條長順直、色澤黃亮、粉性足、綿性強、豆腥味濃等特點，在國內(nèi)外享有很高聲譽，因此恒山黃芪被醫(yī)藥行業(yè)公認為道地黃芪。上世紀70～80年代，甘肅、內(nèi)蒙、山西等地探索的育苗移栽2年生蒙古黃芪栽培技術(shù)獲得成功，得到大面積推廣。從目前銷售市場和價格來看，恒山黃芪與其它產(chǎn)地黃芪相比有著明顯的價格優(yōu)勢，但重利之下帶來的無序經(jīng)營，造成了巨大的負面效應(yīng)。造成這種現(xiàn)象

3、的最主要原因就是質(zhì)量標準的缺失與不完整。而目前市售的絕大部分黃芪藥材無論從外觀性狀還是內(nèi)在品質(zhì)均與傳統(tǒng)恒山黃芪道地藥材相去甚遠。同時《中國藥典》黃芪項下的質(zhì)量標準各方面都比較籠統(tǒng)，主要表現(xiàn)在1.《中國藥典》中規(guī)定了黃芪來源于兩個種，并未進行區(qū)分;2.沒有規(guī)定種植年限和方式;3.指標不全面，含量限度僅為最低合格標準。因此《中國藥典》并不能切實、全面地反映恒山黃芪的特點。為了體現(xiàn)恒山黃芪道地藥材的特色，應(yīng)當從實際情況出發(fā)，建立適用于恒山黃芪

4、藥材質(zhì)量標準，把恒山黃芪的特色用標準的形式體現(xiàn)出來并且可以用以區(qū)別其他產(chǎn)地的黃芪。山西省地方標準修訂工作為全面提高恒山黃芪的影響力、競爭力，促進恒山黃芪產(chǎn)業(yè)化、現(xiàn)代化和國際化的進程，具有重要意義。
　　 目的:通過對恒山黃芪名稱、來源、性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測定和指紋圖譜等項目全方位的研究，建立完善的恒山黃芪道地藥材質(zhì)量標準。
　　 方法:(1)通過對恒山及其周邊范圍實地考察與文獻調(diào)研，對恒山黃芪名稱、來源、性狀

5、進行修訂。
　　 (2)依據(jù)2010版《中國藥典》黃芪項下鑒別、檢查以及浸出物等項目對恒山黃芪進行測定，依據(jù)研究結(jié)果對含量限度做出合理修訂。
　　 (3)依據(jù)2010版《中國藥典》黃芪項下含量測定方法并結(jié)合文獻對黃芪甲苷含量測定方法及其限度進行修訂;依據(jù)2010版《中國藥典》方法對恒山黃芪毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量進行測定，并根據(jù)測定結(jié)果對含量限度進行合理規(guī)定；參考文獻增加恒山黃芪總多糖的含量測定方法;考察恒山黃芪中豆腥味相

6、關(guān)物質(zhì)正己醛的GC含量測定方法，并根據(jù)測定結(jié)果決定是否收入含量測定項下。
　　 (4)利用HPLC-UV、HPLC-ELSD結(jié)合相似度評價、聚類分析、多元統(tǒng)計分析技術(shù)建立恒山黃芪指紋圖譜與特征圖譜。
　　 結(jié)果:(1)恒山黃芪來源、名稱與性狀研究結(jié)果:對恒山黃芪名稱、來源、產(chǎn)地及分布、生長方式等進行了詳細規(guī)定并制定相應(yīng)的標準，最終確定“恒山黃芪”，即來源于豆科植物蒙古黃芪的干燥根，生長方式規(guī)定為野生與仿野生方式，采收年限

7、規(guī)定在四年以上，主產(chǎn)于恒山及其周邊地區(qū)。根據(jù)恒山黃芪的性狀進行了重新描述，制定可以區(qū)別恒山黃芪與其它產(chǎn)地黃芪的性狀標準，恒山黃芪的主要性狀特征為:長35～100cm，有的可達100cm以上，直徑1.2～3cm。表面淡棕黃色至淡棕褐色，有不整齊的縱皺紋或縱溝。質(zhì)柔韌，斷面纖維性，粉性足，皮部黃白色，木部淡黃色，有放射狀紋理和裂隙，老根中心偶呈枯朽狀，黑褐色或呈空洞。聞之有豆腥氣，味微甜，嚼之豆腥味明顯，嚼后渣少。
　　 (2)恒山

8、黃芪鑒別、檢查和浸出物研究結(jié)果:通過對恒山黃芪與膜莢黃芪的顯微比較，尋找到二者顯微的區(qū)別點為:1.恒山黃芪淀粉粒明顯多于膜莢黃芪，這就是恒山黃芪粉性大的原因。2.膜莢黃芪石細胞多于恒山黃芪，這就說明了膜莢黃芪質(zhì)地較硬，而稱恒山黃芪為綿黃芪。3.在恒山黃芪中發(fā)現(xiàn)木栓層木栓細胞垂周壁薄，而在膜莢黃芪中并未觀察到此種情況。依據(jù)測定結(jié)果把恒山黃芪浸出物含量限度由不得低于17.0％提高至不得低于24.0％。其它鑒別、檢查項目均參照2010版《中國

9、藥典》。
　　 (3)恒山黃芪指標成分含量測定研究結(jié)果:2010版《中國藥典》中黃芪甲苷含量測定方法需經(jīng)過浸泡、索氏提取、正丁醇萃取、氨試液處理及大孔樹脂吸附除雜等步驟，操作繁索，很大程度上影響測定準確性，且耗費時間，但改進后方法省去萃取步驟，操作時間由5天縮短至1天，測定結(jié)果與《中國藥典》方法無顯著性差異，收入標準?！吨袊幍洹伏S芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測定方法簡單、操作可行，因此并未對方法修訂，根據(jù)測定結(jié)果，提高規(guī)定毛蕊異

10、黃酮葡萄糖苷含量不得低于0.070％（2010版《中國藥典》規(guī)定不得低于0.020％）。通過文獻調(diào)研，建立恒山黃芪總多糖（硫酸-苯酚法）含量測定方法，收入標準。對豆腥味相關(guān)物質(zhì)正己醛的GC含量測定方法進行考察，結(jié)果顯示黃芪藥材中正己醛不穩(wěn)定，其含量與放置年限有很大關(guān)系，不適用于質(zhì)量標準，因此未予收載。
　　 (4)恒山黃芪指紋圖譜研究結(jié)果:分別建立了HPLC-UV指紋圖譜和特征圖譜，以及HPLC-ELSD指紋圖譜，并進行了相似度

11、評價、聚類分析、多元統(tǒng)計分析。結(jié)果顯示均能將恒山黃芪與其它產(chǎn)地黃芪進行區(qū)分。經(jīng)過山西省藥檢所復核檢驗，最終HPLC-UV指紋圖譜和HPLC-UV特征圖譜符合要求，收入標準。
　　 結(jié)論:本次修訂的恒山黃芪質(zhì)量標準草案充分展現(xiàn)了山西道地藥材——恒山黃芪質(zhì)優(yōu)特色。經(jīng)山西省食品藥品檢驗所復核，方法可行，限度合理，可作為恒山黃芪藥材的質(zhì)控標準。
　　 與《中國藥典》2010版黃芪標準比較，恒山黃芪地方質(zhì)量標準主要有以下變更內(nèi)容:

12、
　　 1.增加規(guī)定限制了恒山黃芪的基源、生長采收年限與產(chǎn)地范圍，用以區(qū)別不同基源的膜莢黃芪以及2年生育苗移栽的蒙古黃芪。
　　 2.增加了恒山黃芪總多糖的含量測定，增加了恒山黃芪HPLC-UV指紋圖譜和特征圖譜，用以區(qū)別不同基源的膜莢黃芪以及2年生育苗移栽的蒙古黃芪。
　　 3.修訂了恒山黃芪黃芪甲苷含量測定方法，簡化操作，縮短前處理時間。
　　 4.修訂了恒山黃芪的性狀特征，可以區(qū)別不同的膜莢黃芪以及