

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、三葉斑潛蠅Liriomyza trifolu,是一種多食性的世界性害蟲,危害多種蔬菜、花卉,造成產(chǎn)量和品質(zhì)下降。氣味結合蛋白(odorant binding protein,OBP)是一類存在于昆蟲嗅覺感器淋巴液中的小分子酸性蛋白,特異性識別氣味分子,并將化學信號傳遞到受體,引發(fā)嗅覺反應。本研究通過對三葉斑潛蠅進行轉錄組測序,鑒定并克隆氣味結合蛋白基因,對其時空表達情況進行分析,進行原核表達及純化,研究其氣味結合特性及免疫定位情況,為三
2、葉斑潛蠅氣味結合蛋白研究及其嗅覺機制提供理論依據(jù),為綠色防治三葉斑潛蠅提供新的思路和方法。
通過對轉錄組測序結果進行篩選和驗證,最終得到9個三葉斑潛蠅氣味結合蛋白基因,命名為LtriOBP1-9,分為三個亞家族.7個Classic OBPs,1個Minus-C OBP和1個Dimer OBP,而9個三葉斑潛蠅OBPs的無根進化樹顯示其之間的同源性較低,但與美洲斑潛蠅的氣味結合蛋白具有非常高的同源性。
采用qPCR技術
3、,對其進行時空表達分析發(fā)現(xiàn)在不同發(fā)育階段,LtriOBP5在幼蟲期大量表達,LtriOBP4在蛹期大量表達,剩下的7個LtriOBPs均在成蟲期大量表達,且雄蟲表達量均高于雌蟲,雄蟲表達量隨日齡上升或者下降。在不同組織部位中,除了在觸角中特異性表達,還有的在頭部,足部具有一定的表達量。LtriOBPs時空表達的差異性,側面反映出其不僅參與嗅覺過程,還參與味覺反應、生長發(fā)育等過程相關。
為了進一步研究得到的三葉斑潛蠅氣味結合蛋白
4、的蛋白功能,對7個三葉斑潛蠅氣味結合蛋白進行了原核表達及純化,獲得了具有高純度的目的蛋白。
使用1-NPN為熒光探針,測定LtriOBP1-7與25種氣味物質(zhì)的結合能力。LtriOBP1與13種氣味物質(zhì)有結合,其中與β-紫羅蘭酮,亞油酸有較強的結合能力,LtriOBP2與21種氣味物質(zhì)有結合,其中與β-紫羅蘭酮,1-辛烯-3-醇,苯并噻唑結合能力最強;LtriOBP3與9種氣味物質(zhì)有結合,與β-紫羅蘭酮結合能力較強,LtriO
5、BP4只與3種氣味物質(zhì)苯并噻唑,芳樟醇,對乙基苯乙酮有結合,且結合能力均較弱;LtriOBP5只與3種氣味物質(zhì)·α-紫羅蘭酮,亞油酸,亞麻酸有結合,其中與亞麻酸結合能力最強,LtriOBP6與8種氣味物質(zhì)有結合,其中與芳樟醇,亞油酸有較強結合能力,LtriOBP7與21種氣味物質(zhì)均有較強的結合能力,其中與油酸,β-紫羅蘭酮,亞油酸有很強的結合能力。三葉斑潛蠅氣味結合蛋白的結合特性為其引誘劑和驅避劑的開發(fā)利用提供參考。
利用冷凍
6、切片、免疫熒光染色技術對LtriOBP1-7在三葉斑潛蠅頭部、口器、前足附節(jié)及幼蟲和蛹中的蛋白分布情況進行研究。在對觸角鞭節(jié)的蛋白定位中發(fā)現(xiàn),毛形感器和腔錐感器存在著多種具有廣譜性結合氣味物質(zhì)能力的LtriOBPs,表明這兩種感器可能參與三葉斑潛蠅對寄主植物的識別、定位過程等多種嗅覺反應。而錐形感器中存在的OBPs對氣味更具有選擇性,表明錐形感器可能參與特異性的氣味識別過程。此外,還發(fā)現(xiàn)LtriOBP2、5分布于觸角的梗節(jié)中,說明梗節(jié)也
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 美洲斑潛蠅氣味結合蛋白鑒定及功能研究.pdf
- 美洲斑潛蠅與三葉斑潛蠅和南美斑潛蠅種間競爭的初步研究.pdf
- 三葉斑潛蠅(Liriomyza trifolii)及近似種的鑒定技術研究.pdf
- 三葉斑潛蠅實時熒光PCR檢測及地理種源關系研究.pdf
- 江蘇地區(qū)斑潛蠅發(fā)生危害及三葉斑潛蠅HSP70家族基因克隆與表達.pdf
- 三葉斑潛蠅在海南的發(fā)生為害趨勢分析與防控對策.pdf
- 云斑天牛性信息素分離鑒定及氣味結合蛋白結合特性分析.pdf
- 寧夏斑潛蠅的發(fā)生及防治研究.pdf
- 美洲斑潛蠅的種群分化研究.pdf
- 黃腹?jié)撓壚O蜂對美洲斑潛蠅的生理調(diào)控機制研究.pdf
- 桔小實蠅氣味結合蛋白和氣味受體表達模式與OBP99a基因功能研究.pdf
- 稻縱卷葉螟氣味結合蛋白的功能分析.pdf
- 寧夏銀川地區(qū)溫室斑潛蠅種類調(diào)查和美洲斑潛蠅種群發(fā)生與防治研究.pdf
- 32988.蠶豆—南美斑潛蠅—甘藍潛蠅繭蜂之間化學信息的研究
- 暗黑鰓金龜氣味結合蛋白的基因克隆及功能研究.pdf
- 稻縱卷葉螟寄主定位及其氣味結合蛋白功能的研究.pdf
- 幾種斑潛蠅的超微結構及rDNA ITS序列比較研究.pdf
- 三化螟和斑潛蠅發(fā)生預測模型研究與應用.pdf
- 水稻硅結合蛋白的鑒定及功能研究.pdf
- 家蠶氣味結合蛋白基因的研究.pdf
評論
0/150
提交評論