云斑天牛性信息素分離鑒定及氣味結(jié)合蛋白結(jié)合特性分析.pdf

1、云斑天牛Batocerahorsfieldi(Hope)，屬鞘翅目Coleoptera，天?？艭erambycidae，是我國一種重要的林業(yè)蛀干性害蟲。其幼蟲蛀干為害，生活隱蔽且周期較長，研究和防治較為困難。因此，裸露活動(dòng)的成蟲期是研究和防治云斑天牛的關(guān)鍵時(shí)期。為此，本課題在實(shí)驗(yàn)室前期工作的基礎(chǔ)上，對云斑天牛的成蟲交配行為進(jìn)行了系統(tǒng)觀察，通過Y-型嗅覺儀、GC-EAD、GC-MS等儀器及技術(shù)手段對其性信息素（包括接觸性性信息素和揮發(fā)性性

2、信息素）進(jìn)行了分離鑒定，分析了云斑天牛的一個(gè)氣味結(jié)合蛋白(odorantbindingproteinOBPs)BhorOBP2的結(jié)合特性，以期為明確云斑天牛交配行為機(jī)制及云斑天牛性引誘劑研制提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。主要研究結(jié)果如下:
　　1.云斑天牛成蟲的交配節(jié)律
　　通過室內(nèi)實(shí)驗(yàn)，利用攝像機(jī)對云斑天牛的行為進(jìn)行了細(xì)致的觀察與記錄。結(jié)果表明，云斑天牛一天中存在三個(gè)交配高峰時(shí)段，分別為:10:00～12:00;16:00～18

3、:00;23:00～01:00;羽化的前5d～10d交配次數(shù)并不多，10d～15d交配次數(shù)顯著上升;到20d時(shí)其交配次數(shù)達(dá)到高峰，隨后緩慢下降，直到成蟲死亡。
　　2.接觸性信息素的分離鑒定
　　用二氯甲烷和甲醇(2∶1)的混合溶液提取蟲體體表物質(zhì)，通過GC-MS進(jìn)行分離鑒定。結(jié)果如下:鑒定出20種化合物，其中二十五烷(C25)、11-甲基二十五烷(11-Me-C25)、2-甲基二十六烷(2-Me-C26)、二十七烷(C27

4、)、13-甲基二十七烷（13-Me-C27）、3-甲基二十七烷(3-Me-C27)和9-甲基二十九烷(9-Me-C29)可能是云斑天牛雌蟲釋放的接觸性性信息素組分。
　　3.揮發(fā)性信息素的分離鑒定
　　通過Y-型嗅覺儀的結(jié)果確認(rèn)，雄蟲能釋放揮發(fā)性的性信息素;通過GC-EAD檢測表明，雌蟲對雄蟲與寄主植物野薔薇的揮發(fā)物中的某一特定成分有較強(qiáng)的觸角點(diǎn)位活性。據(jù)此判斷，此物質(zhì)可能是云斑天牛揮發(fā)性性信息素的有效組分。通過GC-MS檢