異種動(dòng)物GV期卵母細(xì)胞核移植.pdf

1、內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文異種動(dòng)物GV期卵母細(xì)胞核移植姓名：孟和寶力高申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生殖生物學(xué)與生物技術(shù)指導(dǎo)教師：旭日干張鎖鏈2001.6.1’電融合后異種重構(gòu)卵轉(zhuǎn)入含有卵丘細(xì)胞的培養(yǎng)體系中進(jìn)一步進(jìn)行成熟培養(yǎng)。由綿羊卵母細(xì)胞核和牛卵母細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成的重構(gòu)卵體外成熟培養(yǎng)22小時(shí)、23小時(shí)、24小時(shí)后其核成熟率分別為619％、750％、941％。培養(yǎng)22小時(shí)和23小時(shí)的核成熟率與培養(yǎng)24小時(shí)的核成熟率之間存在顯著差異(PO05)；由牛卵母

2、細(xì)胞核和綿羊卵母細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成的重構(gòu)卵體外成熟培養(yǎng)22小時(shí)、23小時(shí)、24小時(shí)后其核成熟率分別為63O％、738％、920％。培養(yǎng)22小時(shí)和23小時(shí)的核成熟率與24小時(shí)的核成熟率之間存在顯著差異(P005)。表明，異種重構(gòu)卵體外培養(yǎng)24小時(shí)是核成熟的最佳培養(yǎng)時(shí)間，此時(shí)的重構(gòu)卵核成熟率顯著高于裸卵母細(xì)胞同卵丘細(xì)胞共培養(yǎng)的核成熟率(牛941％比734％：綿羊92O％比645％)。推測，能夠電融合的重構(gòu)卵內(nèi)磷脂含量高、磷脂含量與酶活性及細(xì)胞質(zhì)成熟

3、程度有關(guān)。十四、成熟重構(gòu)卵的發(fā)育潛能／成熟重構(gòu)卵胞質(zhì)注射單精子后有636％的卵母細(xì)胞發(fā)育至2細(xì)胞期胚胎，但2細(xì)胞期后停止發(fā)育。這可能與細(xì)胞質(zhì)成熟程度有關(guān)，但其分子機(jī)理有待迸～步研究。對成熟重構(gòu)卵進(jìn)行了孤雌激活以03M甘露醇O1mMCaCl22H2001mMMgCI6H20為電激活液，施以3次16kv／cm、1609sec的電脈沖，3次電脈沖之間J日J(rèn)隔】5rain，有】】8％的重構(gòu)卵發(fā)育到8細(xì)胞即停止胚胎發(fā)育，停止發(fā)育的原因還不清楚，可