丹參素對(duì)PDGF-BB刺激下大鼠肝星狀細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的：觀察丹參素對(duì)血小板衍生生長(zhǎng)因子-BB(PDGF-BB)刺激下大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC)活化增殖，Ⅰ、Ⅲ型膠原合成與分泌，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)蛋白表達(dá)的影響。分析丹參素抑制肝纖維化的分子機(jī)制。
　　方法：采用鏈霉蛋白酶-膠原酶二步消化法提取大鼠HSC，α-SMA免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定提取的HSC。用不同濃度丹參素(0.25、0.125、0.062mmol/L)、ERK通道特異性

2、抑制劑U0126(20nmol/L)和PI3K通道特異性抑制劑LY294002(20nmol/L)分別作用于PDGF-BB(10ng/ml)誘導(dǎo)的HSC24小時(shí)，CCK-8法觀察HSC增殖活性，免疫化學(xué)染色法檢測(cè)Ⅰ、Ⅲ型膠原合成，ELISA法測(cè)定分泌Ⅰ、Ⅲ型膠原的量，Westernblot分析erk1/2、p-erk1/2、akt和p-akt蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：原代提取的HSC約為3.32×107/鼠，存活率大于97％。傳一代的

3、HSC純度大于99％。PDGF-BB10ng/ml處理后，HSC增殖明顯增加，丹參素能抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖的作用，并隨丹參素濃度增加細(xì)胞增殖受到的抑制作用越強(qiáng)(P<0.05)，Ⅰ、Ⅲ型膠原合成及分泌均顯著減少(P<0.05)，p-erk1/2和p-akt蛋白表達(dá)均顯著降低(P<0.05)。
　　結(jié)論：原代提取的大鼠HSC是體外研究肝纖維化良好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。丹參素可通過(guò)抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的HSC增殖和活化，同時(shí)抑制