原子力顯微鏡對生物大分子的研究.pdf

1、對生物大分子立體結構和形態(tài)的認識是我們進一步了解其功能和探討生命現(xiàn)象的重要基礎。原子力顯微鏡（AFM）測定具有高分辨率和直觀可視化的特點，它的樣品制備簡單，不需要經過脫水、抽真空、染色、包埋等這些會使生物分子結構發(fā)生一定改變的復雜處理過程，并可對生物分子在近生理條件下檢測它們的動態(tài)結構信息。這些特點使得它成為研究生物大分子的結構及對其功能影響方面理想的分析檢測工具。因此，自誕生之日起，就被迅速應用到了生物學領域。 本論文利用AF

2、M對細胞色素C分子的形態(tài)和積聚過程進行了觀察，并對核酸分子探針（鉻天青S、溴酚藍）－十六烷基三甲基溴化銨－脫氧核糖核酸這兩個體系的作用方式和共振光散射法對核酸的測定機理進行了研究，其內容主要體現(xiàn)在以下三個方面： 1. 用AFM對不同濃度溶液中細胞色素C分子的存在形態(tài)，以及加入降聚劑和變性劑脲后細胞色素C分子的形態(tài)變化進行了研究。結果顯示，低濃度溶液中細胞色素C分子主要以類球形單體形式存在。濃度較高時，細胞色素C分子發(fā)生聚集，在一

3、定濃度范圍內，細胞色素C的聚集體隨著濃度的提高而增大。加入較高濃度的脲，對細胞色素C的聚集具有明顯的降聚作用。對單體和聚集體的三維尺寸進行了測量和分析。 2. 用AFM對細胞色素C在溫水浴中的積聚過程以及一些外部因素對積聚作用的影響進行了研究，對細胞色素C積聚的不同階段形成的積聚物形態(tài)進行了觀察。結果表明細胞色素C分子間有著較強的相互作用，能自發(fā)地在水溶液中進行積聚，形成有規(guī)則的螺旋狀纖維積聚體。并且其積聚過程受外部環(huán)境因素的影

4、響較大，一定濃度鹽離子的存在對細胞色素C的積聚具有協(xié)同效應。對細胞色素C蛋白的積聚機理和積聚模型進行了探討。 3.用原子力顯微鏡（AFM）考察了有機分子探針鉻天青S（chrome azurol S，CAS）-表面活性劑十六烷基三甲基溴化銨（CTMAB）-脫氧核糖核酸（DNA）以及溴酚藍（Bromophenol blue，BPB）-CTMAB-DNA兩種核酸測定體系的作用方式，以此探討了這兩種體系的共振光散射法測定核酸的機理。結果