原子力顯微術(shù)對(duì)生物分子間相互作用的研究.pdf

1、原子力顯微鏡(Atomic Force Microscopy,縮寫AFM)是通過探針與被測(cè)樣品之間微弱的相互作用力來獲得物質(zhì)表面形貌的信息,自發(fā)明以來已被廣泛應(yīng)用于物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、納米技術(shù)學(xué)等等領(lǐng)域.AFM一問世,就被迅速地應(yīng)用在生物醫(yī)學(xué)工作的前沿,它不僅可以對(duì)DNA、蛋白質(zhì)進(jìn)行形貌分析,還可進(jìn)行直觀下的分子剪輯、DNA特殊定位等高水準(zhǔn)工作.該文主要內(nèi)容及其結(jié)論如下:1)細(xì)胞貼壁對(duì)于研究細(xì)胞微陣列芯片和生物相容性材料具有十分重要的

2、意義.膠原蛋白已經(jīng)被證明有利于改善細(xì)胞貼壁環(huán)境,我們用兩種不同的膠原蛋白修飾載體表面方法,一種方法是將膠原蛋白直接接枝于載體表面,另一種方法是將膠原蛋白接枝于1﹪殼聚糖處理過的載體表面.2)我們固定超螺旋質(zhì)粒DNA分子和λ-DNA分子在3-aminopropyltriethoxysilane(APTES)修飾過的云母上,通過改變pH值來將它們的構(gòu)象變?yōu)榄h(huán)狀和拉直線狀.該文不僅提供了在固相載面上對(duì)DNA分子構(gòu)象的詳細(xì)了解,而且還闡述了原子

3、力顯微鏡(AFM)圖像技術(shù)能作為一個(gè)強(qiáng)有力的工具來研究DNA分子在不同ph值云母上的構(gòu)象變化.3)我們用原子力顯微鏡研究不同濃度的長(zhǎng)春新堿和阿司匹林誘導(dǎo)DNA分子的結(jié)構(gòu)變化.DNA分子同這兩種藥物作用的AFM圖像顯示,長(zhǎng)春新堿作用于DNA分子會(huì)產(chǎn)生一些螺旋圈和不同大小的DNA片段,而阿司匹林作用于DNA分子會(huì)引起DNA鏈寬度變化和構(gòu)型轉(zhuǎn)化.這兩種藥物作用于DNA分子的不同結(jié)構(gòu)變化可歸結(jié)為它們同DNA分子的不同作用機(jī)制.該文的工作對(duì)小分子

4、引起不同的DNA分子結(jié)構(gòu)變化和構(gòu)型轉(zhuǎn)變提供了一種新穎的表征手段,進(jìn)一步用實(shí)驗(yàn)方法說明原子力顯微鏡(AFM)作為一種圖像分析技術(shù)在小分子同DNA大分子相互作用的研究中可發(fā)揮較大的作用和其它儀器設(shè)備無法比擬的直觀、清晰的優(yōu)勢(shì).4)我們用原子力顯微鏡(AFM)獲取了EcoR1甲基化酶同DNA雙鏈結(jié)合體的三維形貌圖像,圖像不僅提供了一個(gè)生物樣品二維的信息,而且也有力地提供了三維的高度信息.我們表征了線型化的pBR322和EcoR1甲基化酶結(jié)合物