臍血造血細(xì)胞的體外保存及誘導(dǎo)生成巨核細(xì)胞及血小板的研究.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文臍血造血細(xì)胞的體外保存及誘導(dǎo)生成巨核細(xì)胞及血小板的研究姓名：李昕申請學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：陳方平20040501如血小板輸注就是預(yù)防和治療因血小板減少而導(dǎo)致的出血并發(fā)癥的重要措施，但目前輸注的血小板主要來源于獻(xiàn)血員，而血小板生存期短，體外容易失活，不易保存，所以獻(xiàn)血員來源的血小板常不能滿足臨床需要，且增加輸血傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)。血小板的具體生成機(jī)制仍有很多未明之處，而如何能在體外形成血小板產(chǎn)品以代替獻(xiàn)血員來

2、源的血小板以克服后者的缺點(diǎn)仍是全世界未能解決的問題。而且目前國內(nèi)亦無從造血干／祖細(xì)胞誘導(dǎo)生成成熟產(chǎn)血小板的巨核細(xì)胞的研究。因此本研究主要探討有效的臍血造血細(xì)胞的低溫保存方法、體外擴(kuò)增巨核細(xì)胞及誘導(dǎo)分化生成血小板，為第三代細(xì)胞治療和體外形成血小板產(chǎn)品奠定基礎(chǔ)。首先我們比較了程序降溫，液氮保存和一70℃冰箱直接保存臍血單個(gè)核造血細(xì)胞對(duì)細(xì)胞活性的影響以及一70。C冰箱直接保存對(duì)臍血CD34細(xì)胞對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響。發(fā)現(xiàn)冷凍對(duì)于臍血單個(gè)核細(xì)胞的

3、活力，CFU—GM形成能力無明顯影響。這兩種凍存方法從細(xì)胞活力、細(xì)胞回收率、CFUGM集落形成能力、CFUGM集落回收率這幾個(gè)指標(biāo)上分析，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異。一70℃冰箱直接保存CD34細(xì)胞對(duì)細(xì)胞活力，CFUGM和CFU—GEMM集落形成能力無明顯影響，對(duì)細(xì)胞回收率的影響與單個(gè)核細(xì)胞相似。本研究結(jié)果提示兩種冷凍方法均可對(duì)臍血單個(gè)核造血細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存，短期保存采用一70℃冰箱可代替程控降溫后液氮保存。由于臍血移植植活慢，血小板減少的