兒茶素對(duì)心臟舒張功能障礙小鼠的實(shí)驗(yàn)性治療.pdf

1、目的：
　　研究鈣降敏劑兒茶素是否能改善限制型心肌病（ Restrictive Cardiomyopathy，RCM）小鼠心臟功能障礙，并從細(xì)胞水平探討直接原因。建立利用高頻超聲心動(dòng)圖動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)小鼠心功能及遙感（telemetry）動(dòng)態(tài)心電記錄的實(shí)驗(yàn)體系，研究RCM小鼠的心臟表型。
　　方法：
　　利用高頻超聲心動(dòng)圖動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)野生型（wild type，WT）及不同突變水平的cTnI193His小鼠的心臟形態(tài)及心臟功能；T

2、elemetry動(dòng)態(tài)心電記錄轉(zhuǎn)基因小鼠的心電生理變化情況，對(duì)小鼠進(jìn)行表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（(-)-epigallocatechin gallate，EGCg）腹腔注射，觀察動(dòng)物心臟變化情況，進(jìn)一步分離心肌細(xì)胞，直接檢測(cè)EGCg對(duì)心肌細(xì)胞機(jī)械特性及鈣瞬變的影響。
　　結(jié)果：
　　1. cTnI193His轉(zhuǎn)基因小鼠心臟舒張功能減退，呈現(xiàn)RCM疾病表型，可作為心臟舒張功能障礙的實(shí)驗(yàn)研究工具；
　　2. cTnI193H

3、is不同突變表達(dá)水平的轉(zhuǎn)基因小鼠，其超聲表現(xiàn)及癥狀與突變水平密切相關(guān)；高頻超聲檢測(cè)轉(zhuǎn)基因小鼠，主要表現(xiàn)為左室舒張末期內(nèi)徑（ left ventricular end diastolic dimension, LVEDD）及容積顯著降低，左室等容舒張時(shí)間(isovolumetric relaxation time, IVRT)延長(zhǎng)，E/A比值降低或倒置，而室壁厚度及心臟收縮功能射血分?jǐn)?shù)（Ejection Fraction，EF）及縮短率（

4、Fraction Shortening，F(xiàn)S）正常，表現(xiàn)出不同程度的心臟舒張功能不全，且在4月齡以后更為明顯。
　　3.使用Telemetry心電記錄可得到小鼠生理狀態(tài)下的長(zhǎng)時(shí)程心電圖，并可對(duì)其進(jìn)行精確量化分析；小鼠心臟心電傳導(dǎo)系統(tǒng)、心電傳導(dǎo)順序與人類一致，但其心室肌復(fù)極過(guò)程缺乏明顯平臺(tái)期，動(dòng)作電位時(shí)程（APD）明顯縮短，心電圖上顯示無(wú)明確的ST段，這是小鼠心電圖與人最大差別。
　　4.同 WT小鼠相比，cTnI193His

5、-L轉(zhuǎn)基因小鼠的心電波形主要表現(xiàn)為 PR間期、QRS時(shí)限延長(zhǎng)，反應(yīng)心房心室壓力增加，但無(wú)電壓改變及心肌缺血壞死波形存在，提示此種突變水平的RCM小鼠在此階段無(wú)心肌肥厚及缺血改變，與高頻超聲結(jié)果一致；兩組小鼠均無(wú)心律失常及傳導(dǎo)阻滯出現(xiàn)。
　　5.腹腔注射EGCg50mg/kg/day共3mon，小鼠能較好耐受。RCM小鼠心臟舒張功能明顯改善，LVEDD增加，收縮功能不受影響。注射后2mon~3mon變化較為明顯。延長(zhǎng)的PR間期縮短。

6、
　　6.短期 EGCg應(yīng)用不能改善嚴(yán)重心臟舒張功能衰竭的癥狀及預(yù)后，但需要增加樣本量已明確其是否能延長(zhǎng)動(dòng)物生存期。
　　7.大劑量 EGCg對(duì)于心臟電生理及心肌、肝臟有明顯的毒副作用，抑制心率及傳導(dǎo)，需要控制劑量，以提高應(yīng)用的安全性。
　　8. EGCg長(zhǎng)期腹腔注射可增加RCM小鼠心肌細(xì)胞肌小節(jié)的長(zhǎng)度；
　　9. EGCg直接作用于心肌細(xì)胞時(shí)，5μM即可使肌小節(jié)長(zhǎng)度增加，舒張過(guò)程及舒張期鈣瞬變加快。